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Funktionelle Untersuchungen zum PTPN11-Genprodukt SHP2 und zu PTPN11 Mutanten, die dem Noonan-Syndrom zugrunde liegen

dc.contributor.advisorSchlüter, Gregor Dr.de
dc.contributor.authorUfartes Mas, Roserde
dc.date.accessioned2012-04-16T14:56:42Zde
dc.date.available2013-01-30T23:50:39Zde
dc.date.issued2006-04-04de
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-ABB7-Fde
dc.identifier.urihttp://dx.doi.org/10.53846/goediss-629
dc.description.abstractDas Noonan-Syndrom (NS) [OMIM 163950] ist ein komplexes Fehlbildungssyndrom, das durch ein charakteristisches Gesicht mit Hypertelorismus und Ptosis, großen und tief sitzenden Ohren, Kleinwuchs, leichter geistiger Behinderung, Kryptorchismus und verschiedene Herzfehlbildungen (vor allem Pulmonalstenosen und hypertrophische Kardiomyopathie) gekennzeichnet ist. NS ist eine relativ häufige Erkrankung mit einem Vorkommen von 1:1000-2500 pro Lebendgeburt. Bei ca. 40-50% der Noonan-Patienten können missense Mutationen im PTPN11-Gen diagnostiziert werden. PTPN11-Mutationen können auch bei der allelische Variante von NS, dem LEOPARD-Syndrom (LS) gefunden werden. PTPN11 kodiert für die Nichtrezeptor Protein-Tyrosin-Phosphatase SHP2, die zwei Src-homology-2 (SH2) Domänen und eine Phosphatase-Domäne besitzt. Die N-terminale SH2-Domäne (N-SH2) ist ein konformativer Schalter: entweder interagiert N-SH2 mit der Phosphatase-Domäne (PTP) und hemmt diese, oder sie bindet an ein Phosphotyrosin-Motiv von Signalpartnern (z.B. Gab1) und lässt die Phosphatase-Domäne frei und aktiv. Alle bisher gefundenen Mutationen in PTPN11 verhindern die Bindung zwischen N-SH2 und PTP, was zu einer Überaktivität der Phosphatase führt.Im Rahmen der vorliegenden Arbeit sollten drei Aspekte untersucht werden. Im ersten Teil der Arbeit stand die Untersuchung unbekannter Ursachen des NS im Vordergrund. Sowohl die Mutationen im PTPN11-Promotor als auch große Deletionen wurden als fragliche Ursachen für das NS in Betracht gezogen. Der zweite Teil der Arbeit konzentrierte sich auf die Bestimmung der Phosphatase-Aktivität von SHP2-Varianten in vitro mit Hilfe eines SOCS1-Luciferase-Assays. Bei gain of function bot sich der Versuch der allelspezifischen Inhibition von PTPN11-Mutanten mit Hilfe der RNAi-Technik an. Schließlich sollte ein Mausmodell für das NS und das LS etabliert werden, da es zu Beginn dieser Arbeit noch kein Mausmodell gab.de
dc.format.mimetypeapplication/pdfde
dc.language.isogerde
dc.rights.urihttp://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyr_diss.htmlde
dc.titleFunktionelle Untersuchungen zum PTPN11-Genprodukt SHP2 und zu PTPN11 Mutanten, die dem Noonan-Syndrom zugrunde liegende
dc.typedoctoralThesisde
dc.title.translatedFunctional analysis of PTPN11 gene product SHP2 and of PTPN11 mutants causing Noonan Syndromede
dc.contributor.refereeEngel, Wolfgang Prof. Dr.de
dc.date.examination2003-01-19de
dc.subject.dnb570 Biowissenschaften, Biologiede
dc.description.abstractengNoonan Syndrome (NS) [OMIM 163950] is an autosomal dominant disorder characterized by short stature, facial dismorphism, webbed neck, heart defects (most commonly pulmonic stenosis and hypertrophic cardiomyopathy), cryptorchism and hematological anomalies. NS is a relatively common developmental disorder (1:1000-1:2500 live births) and is genetically heterogeneous. Approximately 40-50% of NS cases are due to missense mutations in the PTPN11 gene which encodes SHP-2, a non-receptor protein tyrosine phosphatase. The molecular basis of the remaining cases is unknown to date. PTPN11 mutations are also found in LEOPARD syndrome (LS), an allelic variant of NS. SHP-2 is an important component of several signal transduction pathways acting downstream of growth factors, hormone and cytokine receptors. SHP-2 has two Src-homolgy (SH) domains (N-SH2 and C-SH2), a single protein tyrosine phosphatase domain and a C-terminal hydrophilic tail containing two tyrosine phosphorylation sites. SHP-2 activity is controlled through an intramolecular conformation switch. N-SH2 interacts with the tyrosine phosphatase domain in the case of inactive conformation (autoinhibation). To be active SHP-2 needs a disruption between N-SH2 and tyrosine phosphatase domain which is induced by its binding of the phosphotyrosine-containing motifs with its signalling partners. Most NS causative defects are located in or close to the N-SH2 and protein tyrosine phosphatase interacting surfaces which are thought to alter N-SH2/PTP interactions and destabilize the inactive conformation without altering the SHP-2 catalytic domain. This induces a gain of functions in SHP-2.In this present study we investigated three aspects. First of all we performed the research of the unknown cause of NS. We analyzed the PTPN11 promoter and screened for mutations in the promoter in patients without mutations in the coding region of PTPN11. Moreover we performed a deletion screen for exon 3 of PTPN11 in patients without mutations. In the second part we studied the pathogenic role of two new mutations using a SOCS-1-promoter/Luciferase assay showing that these mutations have the same effects on intracellular signalling as known mutations. Furthermore, by using the RNAi method we downregulated in a specific way the gain of function of mutated SHP2. At the end we generated a mouse model for NS and LS.de
dc.contributor.coRefereeHoyer-Fender, Sigrid PD Dr.de
dc.subject.topicMathematics and Computer Sciencede
dc.subject.gerNoonan Syndromde
dc.subject.gerPTPN11de
dc.subject.gerSHP2de
dc.subject.gerPhosphatasede
dc.subject.gerTransgene Mäusede
dc.subject.engNoonan Syndromede
dc.subject.engPTPN11de
dc.subject.engSHP2de
dc.subject.engPhosphatasede
dc.subject.engtransgenic micede
dc.subject.bk42.13de
dc.subject.bk42.20de
dc.identifier.urnurn:nbn:de:gbv:7-webdoc-697-1de
dc.identifier.purlwebdoc-697de
dc.affiliation.instituteBiologische Fakultät inkl. Psychologiede
dc.subject.gokfullWJde
dc.subject.gokfullWFde
dc.identifier.ppn512528446de


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