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dc.contributor.advisor Kohlhase, Jürgen Prof. Dr. de
dc.contributor.author Buck, Anja de
dc.date.accessioned 2012-04-16T14:46:38Z de
dc.date.available 2013-01-30T23:50:24Z de
dc.date.issued 2002-01-11 de
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-ABEF-4 de
dc.description.abstract Das regionsspezifische homöotische Gen spalt (sal) definiert die Identität der posterioren Kopfsegmente bei der Fruchtfliege Drosophila melanogaster während der Embryogenese. Des Weiteren spielt sal eine wichtige Rolle bei der Entwicklung des larvalen Tracheensystems, der Morphogenese des adulten Flügels und beeinflusst zudem die Entwicklung der im peripheren Nervensystem liegenden neuronalen Vorläuferzellen. Das Gen kodiert für einen Transkriptionsfaktor mit einer charakteristischen Struktur, in der drei Doppelzinkfinger über das gesamte Protein verteilt sind. Mutationen im humanen SALL1-Gen verursachen das Townes-Brocks-Syndrom (TBS), ein autosomal-dominant vererbtes Fehlbildungssyndrom. Es ist gekennzeichnet durch Analatresie, Fehlbildungen der oberen Extremitäten, Ohrmuscheldysplasien, seltener Schwerhörigkeit, urogenitale Fehlbildungen, Zehen- und Fußfehlbildungen sowie mentale Retardierung. In dieser Arbeit sollte das zu SALL1 homologe Gen der Maus isoliert und charakterisiert werden, des Weiteren sollte das Expressionsmuster geklärt und eine knock out-Maus hergestellt werden, um einen Modellorganismus für das TBS zu schaffen. Das Sall1-Gen der Maus zeigt eine Homologie von 90 % zu dem humanen SALL1-Gen. Untersuchungen mittels whole mount-in situ-Hybridisierungen zeigten, dass das Expressionsmuster im Mausembryo deutlich mit den beim TBS betroffenen Organen überlappt. Mit einem herkömmlichen knock out-Vektor wurde durch die Klonierung zweier genomischer Fragmente ein Konstrukt hergestellt, mit dem Exon 2 und 3 in embryonalen ES-Zellen durch die Neomycin-Kassette ersetzt wurde. Nach der Injektion in Blastocysten und Reimplantation in scheinschwangere Mäuse konnten hieraus mehrere Chimären gewonnen werden. Zu den murinen Genen Sall2 und Sall3 wurden ebenfalls Expressionsdaten mittels whole mount-in situ-Hybridisierungen gewonnen. Aus neu gewonnenen und bereits vorhandenen Daten wurde ein Sall2-knock out-Konstrukt hergestellt und zur Deletion des Exon 1a und Exon 2 in embryonalen Stammzellen eingesetzt. Positive ES-Zellen wurden in Blastocysten injiziert und die daraus entstandenen Chimären mit Wildtyp-Mäusen verpaart. Die nach weiterer Züchtung entstandenen adulten homozygoten Mäuse zeigen keine Auffälligkeiten, mit unvollständiger Penetranz entwickeln diese Tiere jedoch einen Neuralrohrdefekt, der vermutlich zum pränatalen Absterben führt. de
dc.format.mimetype application/pdf de
dc.language.iso ger de
dc.rights.uri http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm de
dc.title Untersuchungen zur Bedeutung der sal-ähnlichen Gene bei der Maus de
dc.title.translated Studies on the sal-like genes of the mice de
dc.contributor.referee Engel, Wolfgang Prof. Dr. de
dc.date.examination 2001-11-30 de
dc.subject.dnb 570 Biowissenschaften, Biologie de
dc.description.abstracteng The region-specific homeeotic gene spalt (sal) of Drosophila melanogaster is required for the specification of larval posterior head and anterior tail structures during embryogenesis. Furthermore sal plays an important role in the embryonic development of the larval tracheal system and the adult wing morphogenesis and modifies the induction of chordotonal precursors in the embryonic peripheral nervous system. sal encodes a transcription factor of characteristic structure, with three double zinc fingers distributed over the entire protein. Mutations of the human SALL1 gene cause Townes-Brocks syndrome (TBS), an autosomal, dominantly inherited malformation syndrome. The disease is characterized by a combination of anal, renal, limb and ear anomalies, more seldom hearing loss and mental retardation. The aim of this work was to isolate and characterize the mouse gene homologous to the human SALL1 gene, to analyze the expression pattern, and to create a knock out mouse in order to develop a model organism for TBS. The murine Sall1 gene shows 90 % homology to the human SALL1 gene. Whole mount in situ hybridization studies showed a striking overlap of the expression pattern in the mouse embryo and the organs affected in TBS patients.Using two genomic fragments, a knock out construct was cloned in order to replace exon 2 and 3 of Sall1 by a neomycin resistence gene in the genome of embryonic stem cells. By injection of positive cells into mouse blastocysts and reimplantation in pseudopregnant mice several chimeras were created. The expression of the murine Sall2 and Sall3 genes was also studied using whole mount in situ hybridization. Newly gained and already existing data delivered enough information to clone a Sall2 knock out construct that deleted exon 1a and exon 2 in embryonic stem cells. Positive cells were injected into blastocysts and chimeras bred with wild type mice. The adult F2 homozygotic mice do not show an apparent phenotype. Interestingly, some homozygotic embryos show a defect in neural tube closure, probably due to incomplete penetrance, that leads to prenatal lethality. de
dc.contributor.coReferee Hoyer-Fender, Sigrid Prof. Dr. de
dc.subject.topic Mathematics and Computer Science de
dc.subject.ger Maus de
dc.subject.ger Knock out de
dc.subject.ger spalt de
dc.subject.ger Townes-Brocks-Syndrom de
dc.subject.eng Mouse de
dc.subject.eng knock out de
dc.subject.eng spalt de
dc.subject.eng Townes-Brocks syndrom de
dc.subject.bk 42.13 de
dc.subject.bk 42.20 de
dc.subject.bk 42.23 de
dc.identifier.urn urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1131-6 de
dc.identifier.purl webdoc-1131 de
dc.affiliation.institute Biologische Fakultät inkl. Psychologie de
dc.subject.gokfull WD de
dc.identifier.ppn 341035408

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