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dc.contributor.advisor Engel, Wolfgang Prof. Dr. Dr. de
dc.contributor.author Gundsambuu, Batjargal de
dc.date.accessioned 2012-04-16T14:52:43Z de
dc.date.available 2013-01-30T23:50:51Z de
dc.date.issued 2004-05-10 de
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-AD77-F de
dc.description.abstract Um ein besseres Verständnis über die regulatorischen Mechanismen der embryonalen Säugetierentwicklung zu erlangen ist es wichtig neue Gene, die an diesem Prozess beteiligt sind zu isolieren und zu charakterisieren. Eine hilfreiche Methode um die Genfunktion während der Entwicklung zu studieren ist die Generierung von mutierten Mauslinien, denen das voll funktionsfähige Gen fehlt. Eine wichtige Methode zur funktionalen Analyse von Genen ist das Gene-trapping . Gene-trapping in embryonalen Mausstammzellen ermöglicht eine rasche und randomisierte Methode um Gene, die während der Embryonalentwicklung der Maus exprimiert werden, zu identifizieren und zu mutieren.In dieser Arbeit wurden zwei Gene trap Mauslinien untersucht. Zur Untersuchung des Phänotyps wurden heterozygote Tiere verpaart um homozygote Tiere zu erhalten. Allerdings erhielten wir keine homozygoten Nachkommen, was darauf hindeutet, dass die Defizienz der Gene trap Mäuse zum Tod der Embryonen führt. Mit Hilfe des 5 RACE Experiments konnten wir Fragmente der trappend Gens amplifizieren. Analysen der genomischen DNA dieser Mauslinien zeigte, dass der Gen-trap-Vektor in die Mausgene Gtl8 und Arfgef2 integriert worden war. Diese beiden Gene wurden auf molekularer Ebene weiter charakterisiert.Das Gtl8 Gen codiert ein Protein, welches große Ähnlichkeit zum Protein der 4.1 Superfamilie zeigt. Eine Gemeinsamkeit dieser Familie ist die FERM-Domäne. Es konnte gezeigt werden, dass dieses Protein eine wichtige Rolle in der Regulierung von Zytoskelett-Plasmamembran-Interaktionen spielt. Gtl8 könnte eine ähnliche Funktion ausüben, da das Protein in der Nähe der Membran, besonders in Zell-Zell-Kontakt-Regionen lokalisiert ist. Das Gtl8 Gen besteht aus 25 Exons und befindet sich auf dem Maus-Chromosom 1. Die Expression wurde in präimplantierten Embryos, einschließlich befruchteten und unbefruchteten Oozyten, Zwei- und Vierzell-Stadium Embryos, Morula- und Blastozysten- Stadium Embryos nachgewiesen. Auch in erwachsenen Mausgeweben wurde eine ubiquitäre Expression detektiert. Das Maus Arfgef2 Gen ist ein Homologon zum menschlichen ARFGEF2 Gen, welches das BIG2 Protein codiert. Das BIG2 Protein ist in den intrazellulären vesikulären Transport involviert. Das Arfgef2 Gen besteht aus 40 Exons und sein Transkript konnte ubiquitär in erwachsenen Mausgeweben und in präimplantierten Embryos, einschliesslich befruchteten Oozyten, detektiert werden.Weitere Analysen konzentrierten sich auf Entwicklungsstadien von homozygoten Embryos. Es konnte gezeigt werden, dass Gtl8(-/-) homozygote Embryos zwischen Morula- und Blastozystenstadium sterben. Arfgef2(-/-) homozygote Embryos sterben direkt nach der Befruchtung. Damit wurde bewiesen, dass beide Gene in der Präimplantationsentwicklung eine elementäre Rolle spielen. de
dc.format.mimetype application/pdf de
dc.language.iso eng de
dc.rights.uri http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm de
dc.title Molecular and Functional Analysis of two Gene Trap Mouse Lines de
dc.title.alternative Analysis of two Gene Trap Mouse Lines de
dc.type doctoralThesis de
dc.title.translated Molekulare und Funktionelle Analyse von zwei Gene-trap Mauslinien de
dc.contributor.referee Engel, Wolfgang Prof. Dr. de
dc.date.examination 2004-04-28 de
dc.description.abstracteng For better understanding of the mechanisms regulating mammalian embryonic development, the isolation and characterization of new genes involved in this mechanism is important. A useful tool for studying gene function during development is to generate mutant mouse lines lacking a fully functional gene. One of the useful methods for functional analysis of genes is gene trap approach. Gene trapping in mouse embryonic stem cells offers a rapid, but essentially random, method to identify and simultaneously mutate genes expressed during mouse embryonic development.In this work, two gene trap mouse lines were studied. For phenotypical studies, heterozygous animals were bred to obtain homozygous animals. However, no homozygous offspring were obtained, indicating that deficiency of trapped genes by in result in embryonic lethality. 5 RACE experiment allowed us to amplify fragments of the trapped genes. Analysis of the genomic DNA in these lines revealed that the gene trap vector has been integrated in mouse Gtl8 and Arfgef2 genes. The two genes were characterized further at the molecular level.The Gtl8 gene encodes a protein showing high similarity to the Protein 4.1 superfamily. Common sign of this family is the FERM domain and it was demonstrated that these protein could play an important role in regulation of cytoskeleton-plasma membrane interactions. Gtl8 could have a similar function because the protein was localized near to membrane, especially in cell to cell contact region. The Gtl8 gene consists of 25 exons and was localizes on mouse chromosome 1. The expression was observed in preimplantation embryos including fertilized and unfertilized oocyte, 2- to 4-cell stage embryos, morula and blastocyst stage embryos as well as gene expression was detected ubiquitously in adult mouse tissues. The Arfgef2 is a mouse homology of the human ARFGEF2 that encodes the BIG2 protein. The BIG2 protein plays a role in intracellular vesicular transport. The Arfgef2 consists of 40 exons and the transcript was detected ubiquitously in adult mouse tissues as well as in preimplantation embryos including fertilized oocyte.Further analysis focused on developmental stages when homozygous embryos. It was demonstrated that Gtl8(-/-) homozygous embryos die between morula and blastocyst stage. The Arfgef2(-/-) embryos die just after fertilization. Therefore both genes have crucial role in mouse preimplantation development. de
dc.contributor.coReferee Hoyer-Fender, Sigrid PD Dr. de
dc.title.alternativeTranslated Analyse von zwei Gene-trap Mauslinien de
dc.subject.topic Mathematics and Computer Science de
dc.subject.ger Gene trapping de
dc.subject.ger Präimplantationsentwicklung de
dc.subject.ger Blastozyst de
dc.subject.ger 570 Biowissenschaften de
dc.subject.ger Biologie de
dc.subject.eng Gene trapping de
dc.subject.eng Preimplantation development de
dc.subject.eng Blastocyst de
dc.subject.bk 42.13 de
dc.subject.bk 42.20 de
dc.subject.bk 42.23 de
dc.identifier.urn urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-224-0 de
dc.identifier.purl webdoc-224 de
dc.affiliation.institute Biologische Fakultät inkl. Psychologie de
dc.subject.gokfull WK 000: Entwicklungsbiologie de
dc.subject.gokfull WJ 000: Genetik {Biologie} de
dc.identifier.ppn 390207950 de

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