Navigation ▼

Show simple item record

dc.contributor.advisor Stülke, Jörg Prof. Dr. de
dc.contributor.author Gomes, Fernanda Ramos de
dc.date.accessioned 2012-04-16T14:53:21Z de
dc.date.available 2013-01-30T23:51:02Z de
dc.date.issued 2011-05-03 de
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-ADAF-4 de
dc.description.abstract Der menschliche Ether-à-go-go Kaliumkanal (hEag1) nachgewiesen werden in adulten Gehirn und in beiden Tumorzelllinien und primären Tumoren. Das physiologische Funktion dieses Kanals im Gehirn bleibt zu aufgeklärt. Die Anwesenheit von hEag1 in Tumoren hat zu einem Anstieg in Verbindung gebracht worden in Proliferation. Veröffentlichte Berichte behaupteten, dass die IGR39 Melanomzellen Linie ist für hEag1 negativ, was erlaubt diese Zelle als negativ verwendet werden zu steuern. Wir beobachteten, dass IGR39 Zellen positiv Verstärkung für Shows hEag1, auf mRNA-Ebene, und ein Protein mit kompatiblen Molekulargewicht und Reaktivität für hEag1 Antikörper wurde in Western-Blot Experimente. Die biophysikalischen Eigenschaften der aktuellen in IGR39 registriert präsentiert eine andere Kinetik, aber es ist noch empfindlich durch Medikamente blockiert und siRNA spezifisch für hEag1. Mit molekularbiologischen Techniken, wir fanden die Expression von zwei neuen Splice-Varianten, E65 und E70, in zwei Melanom-Zelllinien (IPC298 und IGR39) und in neuralen Stammzellen. Die beiden Spleißvarianten haben keine Transmembrandomänen und bilden keine funktionale membrangebundene Kanal. Eine Charakterisierung des neuen Splice Varianten wurde in Xenopus Oozyten leavis getan, um die Wechselwirkung von verifizieren die Spleißvarianten mit full-length hEag1 (fl-hEag1). Elektrophysiologische Messungen der Oozyten, die zusammen mit der injizierten Spleißvariante E65 und die fl-hEag1 zeigte einen gleichgerichteten Strom mit verminderte Amplitude. Auch die Co-Injektion von E65 und FL-hEag1 ermöglicht diese Eizellen zu reifen, die das gleiche Ergebnis wurde der Behandlung von Oozyten mit Progesteron. Basierend auf diesen Ergebnissen haben wir Schluss, dass IGR39 Zelllinie ausdrücken Eag1 Kanäle und die Spleiß Varianten finden in diesen Melanomzellen konnte sowohl die Interaktion mit dem sein in voller Länge Eag1 oder spielen eine Rolle bei der intrazellulären Signalwege. de
dc.format.mimetype application/pdf de
dc.language.iso eng de
dc.rights.uri http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/ de
dc.title Analysis of ether-à-go-go potassium channel (Eag1) splice variants in melanoma cells de
dc.type doctoralThesis de
dc.contributor.referee Göpfert, Martin Prof. Dr. de
dc.date.examination 2010-04-29 de
dc.subject.dnb 500 Naturwissenschaften de
dc.description.abstracteng The human ether-à-go-go potassium channel (hEag1) can be detected in adult brain and in both, tumor cell lines and primary tumors. The physiological function of this channel in the brain still remains to be elucidated. The presence of hEag1 in tumors has been linked to an increase in proliferation. Published reports claimed that the IGR39 melanoma cell line is negative for hEag1, what allowed this cell to be used as negative control. We observed that IGR39 cells shows positive amplification for hEag1, at mRNA level, and a protein with compatible molecular weight and reactivity for hEag1 antibody, was detected in western-blot experiments. The biophysical properties of the current registered in IGR39 presents a different kinetics, but it is still sensitive to blocking by drugs and siRNA specific for hEag1. Using molecular biology techniques, we found the expression of two new splice variants, E65 and E70, in two melanoma cell lines (IPC298 and IGR39) and in neural stem cells. The two splice variants have no transmembrane domains and can not form a functional membrane-bound channel. A characterization of the new splice variants was done in Xenopus leavis oocytes, to verify the interaction of the splice variants with the full-length hEag1 (fl-hEag1). Electrophysiological measurements of the oocytes, co-injected with the splice variant E65 and the fl-hEag1, showed a rectified current with diminished amplitude. Moreover, the co-injection of E65 and fl-hEag1 enables these oocytes to mature, which was the same outcome of the treatment of oocytes with progesterone. Based in these results, we conclude that IGR39 cell line express Eag1 channels and the splice variants found in these melanoma cells, could be either interacting with the full-length Eag1 or playing a role in the intracellular signaling. de
dc.contributor.coReferee Wodarz, Andreas Prof. Dr. de
dc.contributor.thirdReferee Schu, Peter Prof. Dr. de
dc.subject.topic Biology (incl. Psychology) de
dc.subject.ger Kaliumkanäle - Krebs - Spleißvarianten de
dc.subject.eng potassium channels - cancer - splice variants de
dc.subject.bk 42.13 de
dc.identifier.urn urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-2524-5 de
dc.identifier.purl webdoc-2524 de
dc.affiliation.institute Biologische Fakultät inkl. Psychologie de
dc.subject.gokfull WA 000: Biologie de
dc.identifier.ppn 661867153 de

Files in this item

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record