Molekulare Charakterisierung von ZFYVE27 und Identifizierung von Deletionen in SPG4

Abstract

Die hereditären spastischen Paraplegien (HSP) sind eine klinisch und genetisch heterogene Gruppe erblicher neurodegenerativer Erkrankungen, welche durch eine progrediente spastische Paraparese und Hyperreflexie der unteren Extremitäten gekennzeichnet sind. Sie können autosomal-dominant, autosomal rezessiv und X-chromosomal vererbt werden. Für einen Teil der autosomal-dominanten Fälle können Mutation in den Genen SPG3 und SPG4 nachgewiesen werden, bei einem Großteil der Erkrankungen bleiben die verantwortlichen Gene jedoch unbekannt. Es wird gezeigt, dass ZFYVE27, welches zu einer als FYVE-Proteine bezeichneten Gruppe gehört, ausschließlich im Gehirn des Menschen effektiv exprimiert wird. Im Gegensatz hierzu ergab der Vergleich mit dem homologen Mausgen zfyve27 für dieses eine ubiquitäre Expression. ZFYVE27 kommt intrazellulär an das Endoplasmatische Retikulum und an Endosomen gebunden vor und ist mit Spastin co-lokalisiert.Die für das Deletionsscreening verwendete Real-Time-PCR erwies sich unter den angewandte Bedingungen als nicht verlässlich genug, und obwohl Ergebnisse anderer Arbeiten eben diese in AD-HSP-Patienten nachweisen konnten, gelang es im Rahmen dieser Arbeit nicht, Deletionen im SPG4-Gen zu finden. Die Sequenzanalyse von ZFYVE27 bei 43 Patienten mit klinisch diagnostizierter AD-HSP ergab fünf Veränderungen auf genomischer Ebene. Dass der hierbei identifizierte Polymorphismus c.572G>T die Ursache der HSP in einer der untersuchten Familien ist und ZFYVE27 somit an der Pathogenese der HSP beteiligt ist, konnte jedoch nicht bewiesen werden.