Analyse transgener Mauslinien mit zelltypspezifischer Expression fluoreszenter Proteine als Modelle für akute Hirntraumata

Abstract

In der vorliegenden Arbeit wurden zwei Mauslinien (PRDA und PRDB), in denen das rote fluoreszente Protein DsRed unter der Kontrolle des PLP-Promotors exprimiert wurde, charakterisiert. Beide Linien zeigten ein in jeder Hinsicht ähnliches Expressionsmuster. DsRed wurde vom zweiten Postnataltag an im Hirnstamm exprimiert. Es fand sich in diesen beiden Linien nur Expression in Zellen, die den oligodendrozytären Marker CNPase exprimierten und eine für oligodendroyztäre Zellen typische Morphologie zeigten. Die Expression erreichte um den 10. Postnataltag das frontale Großhirn. Zwischen dem dritten und 14. Postnataltag kann die PLP-DsRed-Maus gut für entwicklungsbiologische Analysen genutzt werden, da die Zellen die typische Morphologie wachsender Oligodendrozyten zeigen. Es konnte eine langstreckige Anlagerung der Fortsätze an neuronale Fortsätze beobachtet werden. Die Expression wird durch die intrazelluläre Aggregation und wahrscheinlich auch durch die Kompaktierung des Myelins limitiert. Myelinisierende Oligodendrozyten exprimieren kein DsRed mehr in ihren Fortsätzen. DsRed exprimierende Zellen zeigten keine elektrophysiologischen Besonderheiten. Die Expression erleichterte das Auffinden von Oligodendrozyten sehr. Die PLP-DsRed-Maus kann also als Werkzeug für entwicklungsbiologische wie auch elektrophysiologische Studien an Oligodendrozyten genutzt werden. Es wurde außerdem untersucht, wie transgen-exprimierende Zellen auf eine zerebrale Stichverletzung reagieren. Dabei konnte insbesondere das Auftreten einer hGFAP-EGFP/PLP-DsRed-positiven Zelle beobachtet werden, die zwischen dem vierten und 21. Tag nach der Operation detektierbar waren. Diese Zellpopulation wurde immunhistochemisch, morphologisch und elektrophysiologisch als heterogen charakterisiert. Zumindest für eine Subpopulation dieser Zellen konnte nachgewiesen werden, dass sie das Potenzial haben, sich in neuronaler Richtung zu differenzieren.