Zur Rolle von Stra8 in pluripotenten Stammzellen

Abstract

In der vorliegenden Arbeit sollte das Gen Stra8 (Stimulated by retinoic acid gene 8) hinsichtlich seines Expressionsmusters und seiner Rolle in pluripotenten Zellen genauer untersucht werden. Stra8 ist ein Keimzell-spezifisches Gen, das in der prämeiotischen Phase der Spermatogenese exprimiert wird. Da Stra8 jedoch auch in pluripotenten Zellen exprimiert wird, wurde vermutet, dass es eine Rolle bezüglich der Pluripotenz von Stammzellen haben könnte. In der vorliegenden Arbeit konnte zu dem schon bekannten Expressionsmuster im Testis auch eine Stra8-Expression im Ovar post partum nachgewiesen werden. Da von anderen Pluripotenz-assoziierten Genen bekannt ist, dass sie in Präimplantationsembryonen exprimiert werden, wurde in diesen die Stra8-Expression untersucht. Stra8 konnte in allen Stadien, von der unbefruchteten Eizelle bis zur Blastozyste, detektiert werden. Des Weiteren konnte eine Stra8-Expression in verschiedenen ES (Embryonalen Stammzellen)- und maGSC (multipoten! t adult Germline Stem Cells)-Zelllinien nachgewiesen werden. Dabei zeigte sich, dass Stra8 in diesen Zellen zum Teil zytoplasmatisch, aber auch intranukleär lokalisiert ist. Es konnte zudem gezeigt werden, dass die Stra8-Expression in pluripotenten Stammzellen synchron zu der Expression von Pluripotenzgenen auch nach mehreren Passagen noch zu detektieren ist und während der Differenzierung verschwindet. Bei diesen Versuchen ist aufgefallen, dass es innerhalb der ES- und maGSC-Zelllinien sowohl Stra8- positive als auch -negative Zellen gibt. Es wurde vermutet, dass die Stra8-positiven Zellen eventuell pluripotenter sind als die Stra8-negativen Stammzellen. Um diese Vermutung zu untersuchen, wurde die Fähigkeit zur Chimärenbildung von rein Stra8-positiven mit der von einer gemischten Population miteinander verglichen. Es zeigte sich kein Unterschied hinsichtlich der Chimärenbildung. Durch diese Arbeit konnte zwar gezeigt werden, dass das Expressionmuster von Stra8! dem von anderen Pluripotenzgenen entspricht, Stra8 jedoch ke! ine Schl üsselfunktion hinsichtlich der pluripotenten Eigenschaften von Zellen haben kann, da ansonsten der Versuch der Chimärenbildung ein eindeutigeres Ergebnis hervorgebracht hätte.