Expression von Peptidyl-prolyl cis/trans isomerase NIMA-interacting 1 (PIN1) in Blasten von Patienten mit akuter myeloischer Leukämie

Abstract

Die akute myeloische Leukämie ist eine maligne Erkrankung der Hämatopoese, die im spontanen Verlauf in der Regel innerhalb von Tagen bis Wochen zum Tode führt. Auch unter Einsatz optimierter, an Risikofaktoren adaptierter Chemotherapieregime zur Remissionsinduktion und der allogenen Stammzelltransplantation als konsolidierender Therapie sind die Heilungs- und Überlebensraten von AML-Patienten weiterhin verbesserungsbedürftig. Hierbei kommen in klinischen Studien Ansätze zur molekular gezielten Therapie zum Einsatz, beispielsweise der Einsatz von Tyrosinkinaseinhibitoren bei Vorliegen der prognostisch sehr ungünstigen FLT3-Mutation. Wegbereiter für diese Therapieform war die Identifizierung von molekulargenetisch nachweisbaren Aberrationen und die Erforschung der zugrundeliegenden Signalwege in den maligne transformierten Zellen. Als möglicher weiterer Angriffspunkt einer molekular gezielten Therapie könnte Pin1, ein Katalysator von Konformationsänderungen phosphor! ylierter Proteine mit Einfluss auf diverse Zellzyklusregulatoren und Signaltransduktionswege, fungieren. Eine Überexpression von Pin1 wurde bereits bei einer Reihe solider Neoplasien, wie dem Mamma- und dem Prostatakarzinom, nachgewiesen und als unabhängiger negativer prognostischer Marker identifiziert werden. Im Rahmen dieser Arbeit wurde die Expression von Pin1 in den blastären Zellen von erwachsenen und kindlichen Patienten mit akuter myeloischer Leukämie auf Ebene der mRNA und des Proteins untersucht. Eine Kohorte von 123 Patienten wurde mittels konventioneller PCR und im Weiteren 63 Patienten mittels quantitativer real-time PCR (qPCR) analysiert. Zur Auswertung wurden Überlebensanalysen nach Kaplan-Mayer inklusive Subgruppenanalysen für Erwachsene und Kinder sowie statistische Testverfahren (log-rang test) eingesetzt. Auf Proteinebene erfolgten in einigen Fällen vergleichende Untersuchungen mittels Durchflusszytophotometrie und Immunzytologie. Die Expressionshöhe auf mRNA-Ebene korrelierte in diesen Fällen mit dem Nachweis des Pin1-Proteins in der Durchflusszytofotometrie und Immunzytologie. Eine hohe Pin1-Expression in der qPCR war mit einem signifikant schlechteren Gesamtüberleben bei Auswertung der Gesamt-Kohorte von 63 Patienten assoziiert. In Bezug auf Ereignisfreies Überleben sowie Subgruppenanalysen zum Gesamtüberleben zeigte sich eine gleichsinnige Tendenz zu einer prognostisch negativen Assoziation in Abhängigkeit von der Höhe der Pin1-Expression, ein Signifikanzniveau konnte jedoch bei eher kleinen Stichprobenmengen nicht erreicht werden.