Stickoxidmetabolite als Ursache einer differentiellen Myelingenexpression in MS-Läsionen?

Abstract

Stickoxidmetabolite als Ursache einer differentiellen Myelingenexpression in MS-Läsionen? Aktiv entmarkende Multiple-Sklerose-Läsionen lassen sich histopathologisch in vier verschiedene Subtypen einteilen. In Läsionen des Subtyps III findet sich immunhistochemisch eine Dysregulation der Myelinproteine und ein apoptotischer Zelluntergang von Oligodendrozyten. Die oligodendrogliale Zelllinie OLN-93 weist nach Inkubation mit den beiden Zelltodinduktoren SNAP und Peroxynitrit eine Dysregulation der Myelinproteine auf; ähnlich wie im MS-Gewebe wird eine Heraufregulation der PLP-mRNA-Expression beobachtet. Es wurde daher untersucht, ob es sich bei der verstärkten PLP-mRNA-Expression um eine OLN-93-spezifische Reaktion handelt oder ob auch andere oligodendrogliale Zelllinien wie CG-4 oder Primärkulturzellen mit diesem Muster der Myelingenexpression auf Zelltodinduktoren reagieren und sich somit eine Erklärung für die Pathogenese des Subtyps III fände. Mittels MTT-Test, Nukleosomen-ELISA und TUNEL-Färbung wurde nachgewiesen, dass SNAP, Peroxynitrit und Staurosporin in den Zelllinien OLN-93 und CG-4 sowie in Primärkulturzellen Zelltod auslösen. Nach Ende der Inkubationszeit und RNA-Extraktion wurden quantitative Real Time PCRs zur Bestimmung der Expressionsrate der ausgewählten Myelinproteingene PLP, CNP, MAG und MBP durchgeführt. In OLN-93-Zellen tritt die beobachtete verstärkte PLP-mRNA-Expression unabhängig vom Zelltodinduktor auf. Ein ähnliches Phänomen zeigt sich dagegen weder bei CG-4-Zellen noch bei Primärkulturzellen. Bei allen anderen untersuchten Myelinproteinen kam es entweder zu keiner Veränderung oder zu einer Abnahme der Expression nach Inkubation mit den Zelltodinduktoren. Bei der verstärkten PLP-mRNA-Expression in OLN-93-Zellen handelt es sich also um ein zelltypspezifisches Reaktionsmuster. Mit den ausgewählten Zelltodinduktoren ist die Pathogenese des Subtyps III weiterhin nicht zu erklären.