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Die Analyse der Rolle von STAT6 im klassischen Hodgkin-Lymphom

Analysis of the role of STAT6 in classical Hodgkin´s lymphoma

by Kathrin Matthias
Doctoral thesis
Date of Examination:2011-11-21
Date of issue:2011-11-14
Advisor:Prof. Dr. Dieter Kube
Referee:Prof. Dr. Martin Oppermann
Referee:Prof. Dr. Patricia Virsik-Köpp
Persistent Address: http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-B2A3-8

 

 

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Size:2.05Mb
Format:PDF
Description:Dissertation
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Abstract

English

Hodgkin`s lymphoma is a common malignancie oft the lymphsystem.The role of STAT6 (signal transducer and activator of transcription) in Hodgkin´s lymphoma is not entirely revealed. The objective of this study was to further characterize the pathophysiology of STAT6 in common Hodgkin lymphoma by using shRNA targeted against STAT6 in Hodgkin´s lymphoma cell-lines. In the methodical part of this study it could be shown that nucleofection was superior to common electoporation techniques for the utilized Hodgkin lymphoma cell-lines. Thanks to this expertise we were able to establish cell-clones of the Hodgkin lymphoma cell-line L428 with reduced expression of stat6. Afterwards the established cell-clones were characterized for proliferation, apoptosis, expression of B-cell specific cell surface molecules and stat6-expression in western-blot analysis. For this cell-line we were able to show that stat6 is essential for proliferation and inhibition of stat6 leads to growth arrest of this lymphoma cells. The resistance against staurosporin-and CD95/FAS/Apo-1-mediated apoptosis in Hodgkin´s lymphoma cells wasn´t influenced by inhibition of stat6. In conclusion we could underline the hypothesis that constitutive active stat6 plays a role in pathogenesis of Hodgkin´s lymphoma and the identification of important STAT regulated genes could lead to new diagnostic or prognostic markers and might be an aim for new specific therapies.
Keywords: Hodgkin´s lymphoma; STAT6; western blot; transcription factor; flow cytometry

Other Languages

Beim Hodgkin-Lymphom handelt es sich um einen bösartigen Tumor des Lymphsystems. Die Bedeutung von STAT6 für die Pathogenese des Hodgkin-Lymphoms ist nur unzureichend geklärt. Zielsetzung der vorliegenden Arbeit war es, durch den Einsatz von spezifisch gegen STAT6 gerichteter shRNA die pathophysiologische Bedeutung von STAT6 für ausgewählte Hodgkin-Zelllinien näher zu charakterisieren. Im methodischen Teil der Arbeit konnte gezeigt werden, dass sich die Technik der Nukleofektion als spezielle Variante der Elektroporation für die schwer transfizierbaren Hodgkin-Zelllinien als den herkömmlichen Methoden überlegen erweist. Mit Hilfe der gewonnenen Kenntnisse konnten Zellen der Zelllinie L428 mit reduzierter STAT6-Expression etabliert werden. Im zweiten Teil der Arbeit wurden die pSUPERneoSTAT6si-Zellklone hinsichtlich des Proliferationsverhaltens, der Apoptoseneigung, dem Expressionsmuster von B-Zell-spezifischen Oberflächenmarkern sowie der STAT6-Expression im Western-Blot charakterisiert. Es konnte für die Hodgkin-Zelllinie L428 gezeigt werden, dass STAT6 essentiell für die Proliferation ist und eine Inhibition von STAT6 zu einem Wachstumsnachteil der Lymphomzellen führt. Die bestehende Resistenz der malignen Zellen des Hodgkin-Lymphoms gegenüber Staurosporin-sowie CD95/Fas/Apo-1-vermittelter Apoptose konnte durch die Inhibition von STAT6 in den untersuchten Zellklonen nicht beeinflusst werden.Die vorliegende Arbeit stützt die Hypothese, dass konstitutiv aktiviertes STAT6 wichtig für das Hodgkin-Lymphom ist, ebenso wie die Identifizierung funktionell wichtiger STAT-regulierter Gene und ihre Charakterisierung als diagnostische oder prognostische Faktoren oder mögliche Ziele für neuere spezifischere Therapien.
Schlagwörter: Hodgkin-Lymphom; STAT6; Transkriptionsfaktor; Nukleofektion; Western-Blot; FACS-Anlayse
 

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