dc.contributor.advisor | Jansen, Stephan PD Dr. | de |
dc.contributor.author | Bull, Leonard | de |
dc.date.accessioned | 2012-05-16T12:09:39Z | de |
dc.date.available | 2013-01-30T23:50:26Z | de |
dc.date.issued | 2004-03-04 | de |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-B63B-0 | de |
dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.53846/goediss-1325 | |
dc.description.abstract | Während der Frühphase der Befruchtung interagieren
die Eizelle und das Spermatozoon in komplexer Weise.
Die männlichen und weiblichen Gameten müssen sich
erkennen, aneinander binden und Signale austauchen, die
eine ganze Reihe von biochemischen Reaktionen nach sich
ziehen und letztendlich zur Fusion führen. Diese
Interaktionen werden von spezialisierten Mölekülen
übernommen, die auf den Oberflächen sowie auf den
Membranen der Gameten lokalisiert sind. In dieser
Arbeit wurde das 95 kDa Spermadhäsionsprotein in Sus
scrofa characterisiert.Mittels detaillierter Northern- und RT-PCR Analysen
wurde die Expression der 95 kDa Spermadhäsionprotein in
6 verschiedenen Geweben untersucht. Es konnte gezeigt
werden, dass das Protein ausschließlich in den
testicular Keimzellen exprimiert wird, während der
postmeiotitischen Phase.Um die phylogenetische Evolution des 95 kDa
Spermadhäsionsproteins besser zu verstehen und seine
Funktion nachzuvollziehen, wurde mit Hilfe der
Animosäurensequenz ein phylogenetischer Stammbaum der
konservativen katalytischen Domäne erstellt. Dreizehn
bereits charakterisierte Proteinkinasen wurden
hinzugezogen.Außerdem bestätigten Ergebnisse aus dem
Homologieergleich der Nukleotidsequenzen, dass das 95
kDa Spermadhäsionsprotein zur Gruppe der
Tyrosin-Rezeptorkinasen gehört.
Die Untersuchungen zeigten die wesentlichen Merkmale
dieser Proteingruppe, wie die stark konservierten
kurzsträngigen Aminosäuren, Vorhandensein von
Phosphotyrosinreste und einem einmal durchquerenden
Transmembranprotein mit zwei funktionalen
Bindungsstellen. An der extrazellulären Stelle bindet
spezifisch ZP3, während die intrazelluläre Stelle
enzymatische Tyrosinkinase aktivitäten zeigt, die bei
der Bindung von ZP3 aktiviert werden. Dieses Wissen
dient als Grundlage für das Verständnis der Rolle des
Spermadhäsionsproteins in der Frühphase der
Befruchtung.Ausserdem wurden, um die Genomstruktur des 95 kDa
Gens zu analysieren, Primern aus humaner 95 kDa mRNA
zur Screenen porcine Genombibliotheken hergeleitet. Ein
positiver PAC-Klon wurde isoliert und anschließend
sequenziert. Das 95 kDa Gen besteht aus sieben exons,
wobei exon sech die gesamte in Säugetieren stark
konservierten katalytische Domäne überspannt. Die
Screenen der somatic- and radiation hybrid panels
katiert das Gen dem Chromosom 3q11-12. Dies wurde durch
FISH-Analysen bestätigt. Es wurde jedoch keine Syntenie
zwischen der q arme der Chromosome HSA und SSC
festgestellt.Die Ergebnisse dieser Arbeit bestätigten die
Klassifikation des 95 kDa Spermadhäsionsproteins und
lieferten neue Erkenntnisse über ihre Funktion,
Genomstruktur und chromosomale Lokalisation. | de |
dc.format.mimetype | application/pdf | de |
dc.language.iso | eng | de |
dc.rights.uri | http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm | de |
dc.title | Characterization of the 95 kDa sperm adhesion protein | de |
dc.type | doctoralThesis | de |
dc.title.translated | Charakterizierung des 95 kDa Spermienadhäsionsproteins | de |
dc.contributor.referee | Fritz, Hans-Joachim Prof. Dr. | de |
dc.date.examination | 2004-01-22 | de |
dc.description.abstracteng | During the early stages of fertilisation, the
interaction between the spermatozoa and the oocyte
involves complex mechanism. The events of gamete
recognition and binding triggers signal transduction
which initiates biochemical pathways leading to fusion.
This interaction is mediated by a plethora from
molecules located at the cell surface and in the plasma
membrane. In this work, the 95 kDa sperm adhesion
receptor protein was characterized in Sus scrofa.By means of Northern- and RT-PCR assays the
expression of the 95 kDa sperm adhesion protein was
examined in 6 different porcine tissues. It was found
that the protein is exclusively expressed in the
testicular cells at the postmeiotitic phase of
development.In order to understand the evolution and predict the
function of the 95 kDa sperm adhesion protein a
phylogenetic tree (rooted tree) using the amino acid
sequence of the conserved catalytic domain was plotted.
Thirteen already characterized protein kinase were
included in the tree.In addition, information obtained from the alignment
of nucleotide sequences, confirmed the classification
of the 95 kDa sperm adhesion protein to the tyrosine
kinase receptor family.These results revealed the characteristic features
of the family, which are highly conserved
short-stretches of amino acids, presence of
phosphotyrosine residues, and a single pass
transmembrane protein with two functional sites. The
extracellular site specifically binds ZP3 while the
intracellular has tyrosine kinase enzymatic activity,
which is stimulated when the protein binds ZP3. This
knowledge serves as a major first step towards the
understanding of the role of the sperm adhesion protein
during the early stages of fertilization.Furthermore, to analyse the genomic structure of the
95 kDa gene, primers derived from human 95 kDa mRNA
were designed to screen porcine genomic libraries. A
positive PAC clone was isolated and the gene sequenced.
The 95 kDa gene consists of 7 exons with exon 6
spanning the entire catalytic domain which is highly
conserved in mammalian. Screening of the somatic- and
radiation hybrid panel assigned the gene to chromosome
3q11-12. This was confirmed by FISH analysis. However,
no synteny was confirmed between the q arms of
chromosomes HSA and SSC.The data presented in this work confirmed the
classification of the 95 kDa sperm adhesion protein and
provides new insights in its function, genomic
structure and chromosomal localization. | de |
dc.contributor.coReferee | Engel, Wolfgang Prof. Dr. Dr. | de |
dc.subject.topic | Mathematics and Computer Science | de |
dc.subject.ger | 500 Naturwissenschaften allgemein | de |
dc.subject.ger | Zona pellucida bindende Proteine (ZBP) | de |
dc.subject.ger | 95 kDa spermadhäsionsprotein | de |
dc.subject.ger | Befruchtung | de |
dc.subject.ger | Spermatozoen | de |
dc.subject.eng | Zona pellucida binding proteins (ZBP) | de |
dc.subject.eng | 95 kDa sperm adhesion protein | de |
dc.subject.eng | Fertilisation | de |
dc.subject.eng | Spermatozoa | de |
dc.subject.bk | 42.13 Molekularbiologie | de |
dc.identifier.urn | urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-185-3 | de |
dc.identifier.purl | webdoc-185 | de |
dc.affiliation.institute | Biologische Fakultät inkl. Psychologie | de |
dc.subject.gokfull | WF | de |
dc.identifier.ppn | 386082006 | de |