dc.contributor.advisor | Groß, Uwe Prof. Dr. | de |
dc.contributor.author | Schettler, Rolf Christian | de |
dc.date.accessioned | 2013-01-14T15:18:02Z | de |
dc.date.available | 2013-01-30T23:50:52Z | de |
dc.date.issued | 2012-05-15 | de |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-000D-EFB2-D | de |
dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.53846/goediss-1523 | |
dc.description.abstract | Die schnelle und effiziente Diagnostik
systemischer Mykosen ist essentiell für ein effektives
Therapieregime des häufig immunsupprimierten Patientenkollektivs.
Hierfür bietet das Verfahren der PCR einen guten diagnostischen
Ansatz. Die Schwierigkeit besteht jedoch in der möglichst
sensitiven DNA-Isolation, wozu unterschiedliche Verfahren
publiziert wurden. In dieser Arbeit wurden sechs unterschiedliche
DNA- Aufarbeitungsprotokolle für Candida albicans, Aspergillus
fumigatus und Saccharomyces cerevisiae unter in-vitro-Bedingungen
bzgl. Zeitbedarf und Sensitivität mineinander verglichen. Es zeigte
sich, dass die Kombination aus enzymatischer Lyse und thermischer
Ruptur zwar den höchsten Zeitbedarf gegenüber der rein thermischen,
rein enzymatischen bzw. rein mechanischen Verfahren bei der
DNA-Isolation hat, gleichzeitig jedoch die sensitivsten Ergebnisse
liefert. Anschließend ergab ein Vergleich von drei
unterschiedlichen PCR-Protokollen eine deutlich verbesserte
Zeiteffizienz der real-time-PCR-Technik bei gleichzeitig höherer
Sensitivität gegenüber der konventionellen PCR bzw. Nested-PCR. Die
Kombination aus enzymatisch-thermischer DNA-Isolation mit Anwendung
der RT-PCR-Technik stellt somit die effizienteste und sensitivste
Nachweismethode humanpathogener Pilzspezies dar. | de |
dc.format.mimetype | application/pdf | de |
dc.language.iso | ger | de |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/ | de |
dc.title | Optimierung der molekularbiologischen Diagnostik systemischer Mykosen | de |
dc.type | doctoralThesis | de |
dc.title.translated | Optimization of the molecular diagnosis of systemic mycoses | de |
dc.contributor.referee | Groß, Uwe Prof. Dr. | de |
dc.date.examination | 2012-06-04 | de |
dc.subject.dnb | 610 Medizin, Gesundheit | de |
dc.subject.gok | MED 333 | de |
dc.description.abstracteng | The rapid and efficient diagnosis of
systemic fungal infections is essential for an effective
therapeutic regimen of frequent immunosuppressed patient
population. For this purpose, the PCR method offers a good
diagnostic approach. The difficulty, however, is the most sensitive
DNA isolation, including various methods have been published. In
this study we compared six different DNA processing protocols for
Candida albicans, Aspergillus fumigatus, and Saccharomyces
cerevisiae under in vitro conditions in terms of speed and
sensitivity. It was found that the combination of enzymatic lysis
and thermal rupture is most time consuming towards to the purely
thermal, purely enzymatic or purely mechanical method of DNA
isolation but provides the most sensitive results. The subsequent
comparison of three different PCR protocols showed a significantly
improved time efficiency of real-time PCR technique coupled with
higher sensitivity compared to conventional PCR and nested PCR.
Thus, the combination of enzymatic-thermal DNA isolation with the
use of RT-PCR technique is the most efficient and most sensitive
method of detection of human pathogenic fungal species. | de |
dc.contributor.coReferee | Weidmann, Manfred PD Dr. | de |
dc.subject.topic | Medicine | de |
dc.subject.ger | Candida albicans; Aspergillus fumigatus; Saccharomyces cerevisiae; PCR; Real-Time-PCR; RT-PCR; Nested-PCR | de |
dc.subject.eng | Candida albicans; Aspergillus fumigatus; Saccharomyces cerevisiae; PCR; Real-Time-PCR; RT-PCR; Nested-PCR | de |
dc.subject.bk | 44.43 | de |
dc.identifier.urn | urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-3510-2 | de |
dc.identifier.purl | webdoc-3510 | de |
dc.affiliation.institute | Medizinische Fakultät | de |
dc.identifier.ppn | 729075842 | de |