Der Einfluss von NR3C1 und PDK4 auf das Wachstum kolorektaler Tumorzellen

Abstract

Kolorektale Karzinome entstehen aus Zellen der Darmschleimhaut, in denen durch genetische Veränderungen Störungen der Differenzierung und der Wachstumskontrolle aufgetreten sind. Das Verständnis der molekularen Vorgänge in der Entstehung und der Progression des kolorektalen Karzinoms ist daher von großer Bedeutung und legt den Grundstein für die Entwicklung neuer Therapieansätze für die Behandlung des kolorektalen Karzinoms. Das Ziel dieser Arbeit war die Untersuchung ausgewählter Gene auf ihre mögliche Bedeutung für das Wachstum und die Proliferation kolorektaler Tumorzellen. Diese Gene hatten in vorherigen Genexpressionsanalysen unserer Arbeitsgruppe eine verminderte Expression in Primärtumoren im Vergleich zur gesunden Mukosa gezeigt. Es wurde die Expression von insgesamt sechs Genen mittels semi-quantitativen real-time-PCR in kolorektalen Karzinomzelllinien überprüft. Zwei dieser Gene, PDK4 und NR3C1, wurden nachfolgend in der kolorektalen Karzinomzelllinie SW480 mittels eines induzierbaren Vektorsystems stabil überexprimiert. Nach Einzelzellklonierung wurden anschließend mittels Western Blot diejenigen Klone identifiziert, die das entsprechende Gen am stärksten exprimieren. Diese wurden schließlich in funktionellen Analysen auf ihre Viabilität und Koloniebildungsfähigkeit untersucht. Es konnte gezeigt werden, dass die Viabilität von SW480-Zellen weder durch die Überexpression von NR3C1 noch von PDK4 vermindert wird. Allerdings wird die Koloniebildungsfähigkeit eingeschränkt. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass sowohl NR3C1 als auch PDK4 möglicherweise eine funktionelle Bedeutung für das kolorektale Karzinom haben und könnten den Grundstein für weitere Untersuchungen basierend auf der in dieser Arbeit etablierten Methodik legen.