dc.contributor.advisor | Figura, Kurt von Prof. Dr. Dr. h.c. | de |
dc.contributor.author | Rindermann, Jan | de |
dc.date.accessioned | 2013-01-14T15:35:12Z | de |
dc.date.available | 2013-01-30T23:50:51Z | de |
dc.date.issued | 2012-11-27 | de |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-000D-F037-F | de |
dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.53846/goediss-1655 | |
dc.description.abstract | CDG-Ia ist eine genetisch bedingte
Stoffwechselstörung, die eine fehlerhafte Synthese von
Glykoproteinen zur Folge hat. Ursache sind Mutationen in der
genetischen Information für das Enzym Phosphomannomutase II (PMM2).
Inhalt dieser Arbeit ist die Generierung von zwei
Gene-Targeting-Vektoren (GTV) und den entsprechenden transgenen
embryonalen Maus-Stammzellen, welche jeweils die beiden häufigsten
Mutationen R141H und F119L (R137H und F115L im Maus-Genom) tragen.
Ausgangsprodukt ist ein Teil des murinen Pmm2-Gens, welcher in
einen pBlueScript-Vektor subkloniert wird. Mit gezielter
in-vitro-Mutagenese erfolgt das Einbringen der jeweiligen Mutation.
Als Selektionsmarker für beide GTV dient ein von zwei loxP-
Sequenzen flankiertes Neomycin-Resistenz-Gen (Neo). Die beiden
derart konstruierten GTV, welche jeweils die Mutation F115L bzw.
R137H beinhalten, werden als linearisiertes Konstrukt durch
Elektroporation in embryonale Mausstammzellen transferiert. Nach
Überprüfung der erfolgreichen homologen Rekombination wird je ein
Stammzell-Klon mit dem Genotyp F115L/WT und R137H/WT mit einem
Cre-Rekombinase-Gen transfiziert und die erfolgreiche Entfernung
des Neo-Gens überprüft. Mit diesen transgenen Stammzellen sollen
hypomorphe Mausmodelle für CDG-Ia generiert werden. | de |
dc.format.mimetype | application/pdf | de |
dc.language.iso | ger | de |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/ | de |
dc.title | Herstellung zweier Gene-Targeting-Vektoren zur Generierung von Mausmodellen für CDG-Ia mit den Mutationen F115L und R137H im PMM2-Gen | de |
dc.type | doctoralThesis | de |
dc.title.translated | Construction of two gene targeting vectors to generate mouse models for CDG-Ia containing the mutations F115L and R137H in the Pmm2 gene. | de |
dc.contributor.referee | Figura, Kurt von Prof. em. Dr. Dr. h.c. | de |
dc.date.examination | 2012-12-12 | de |
dc.subject.dnb | 610 Medizin, Gesundheit | de |
dc.subject.gok | MED 283Molekularbiologie | de |
dc.subject.gok | MED 321Biochemie | de |
dc.subject.gok | MED 461Pädiatrie | de |
dc.description.abstracteng | CDG-Ia is a metabolic disease caused by
mutations in the gene encoding phosphomannomutase II (PMM2) and
affecting the glycosylation pathway of glycoproteins. The topic of
this paper is the construction of two gene targeting vectors (GTV)
and the corresponding embryonic stem cells, including the most
frequent mutations R141H and F119L (R137H and F115L in the murine
genom) respectively. Starting product is a part of a murine Pmm2
gene being inserted in a pBlueScript vector. Using in vitro
site-directed mutagenesis the two mutations are generated. A
neomycin resistance gene (neo), flanked by loxP sites, is used as a
selectable marker. These two linearized GTV, each including the neo
gene and the mutation R137H and F115L respectively are transferred
to embryonic mouse stem cells via electroporation. After
verification of successful homologous recombination, the transgenic
stem cells possessing the genotype F115L/WT and R137H/WT
respectively are transfected with a Cre recombinase to eliminate
the neo gene. These transgenic stem cells should be used to create
hypomorphic mouse models for CDG-Ia. | de |
dc.contributor.coReferee | Steinfeld, Robert Prof. Dr. Dr. | de |
dc.contributor.thirdReferee | Crozier, Thomas Prof. Dr. Dr. | de |
dc.subject.topic | Medicine | de |
dc.subject.ger | CDG | de |
dc.subject.ger | CDG-Ia | de |
dc.subject.ger | Mausmodell | de |
dc.subject.ger | PMM2 | de |
dc.subject.ger | Phosphomannomutase II | de |
dc.subject.ger | F119L | de |
dc.subject.ger | R141H | de |
dc.subject.ger | congenital disorders of glycosylation | de |
dc.subject.eng | CDG | de |
dc.subject.eng | CDG-Ia | de |
dc.subject.eng | mouse model | de |
dc.subject.eng | PMM2 | de |
dc.subject.eng | phosphomannomutase II | de |
dc.subject.eng | F119L | de |
dc.subject.eng | R141H | de |
dc.subject.eng | congenital disorders of glycosylation | de |
dc.subject.bk | 44.77 Stoffwechselkrankheiten | de |
dc.subject.bk | 44.48 Medizinische Genetik | de |
dc.identifier.urn | urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-3813-5 | de |
dc.identifier.purl | webdoc-3813 | de |
dc.affiliation.institute | Medizinische Fakultät | de |
dc.identifier.ppn | 737898577 | de |