dc.contributor.advisor | Hahn, Heidi Prof. Dr. | de |
dc.contributor.author | Uhmann, Anja | de |
dc.date.accessioned | 2013-01-31T07:56:51Z | de |
dc.date.available | 2013-01-31T07:56:51Z | de |
dc.date.issued | 2007-02-05 | de |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-000D-F223-B | de |
dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.53846/goediss-3601 | |
dc.description.abstract | Heterozygote Keimbahnmutationen des Sonic
Hedgehog (Shh) Rezeptors Patched (Ptch) sind im Gegensatz zu
homozygoten Mutationen nicht letal und prädisponieren mit hoher
Wahrscheinlichkeit zur Entstehung von Basaliomen, Medulloblastomen
und Rhabdomyosarkomen (RMS). Heute wird angenommen, dass es sich
bei Ptch um ein Tumorsuppressorgen handelt, da für die Entstehung
von Basaliomen die biallelische Inaktivierung von Ptch auf
somatischer Ebene notwendig ist. Dagegen konnte jedoch gezeigt
werden, dass für die Entstehung von RMS und MB ein monoallelischer
Ausfall von Ptch genügt. Ziel dieser Arbeit war es, die Pathogenese
von Ptch-assoziierten RMS besser zu verstehen. Des Weiteren sollte
der Versuch unternommen werden, die Ausgangszelle dieser Tumoren zu
identifizieren. Im Rahmen dieser Arbeit wurde zunächst mit Hilfe
anderer Labormitglieder demonstriert, dass die Entstehung von RMS
in heterozygoten Ptchneo67/+ Mäusen durch ein Ungleichgewicht der
Expression des mutanten und des Wildtyp (wt) Ptch Allels zu
erklären ist. Dabei wird in RMS das mutante Allel verstärkt, das wt
Allel hingegen vermindert exprimiert. Um diese Beobachtung
tiefergehend zu analysieren, wurden die verschiedenen
Spleissvarianten von Ptch im RMS untersucht. Des Weiteren wurde
gezeigt, dass der Shh/Ptch Signalweg sowohl durch die Expression
von mutantem Ptch Protein als auch durch die Reduktion von wt Ptch
aktiviert wird. Aufgrund der Ergebnisse wurde ein Modell zur
Entstehung von Ptch-assoziierten RMS vorgeschlagen, in dem die
Tumorentstehung durch mutationsbedingte Inaktivierung eines Ptch
Allels und transkriptionelles Abschalten des anderen Allels
induziert wird (Uhmann A et al., 2005). Um die Entstehung von
Ptch-assoziierten Tumoren im Detail untersuchen zu können, wurde
eine mutante Mauslinie charakterisiert, die die konditionelle,
biallelische Deletion von Ptch im adulten Organismus ermöglicht.
Unter Verwendung einer induzierbaren Cre-Rekombinase wurde Ptch
systemisch in adulten Mäusen inaktiviert. Innerhalb kürzester Zeit
führte dies zu hyperproliferativen Veränderungen der Haut, des
Gastrointestinaltrakts und des Mesenteriums. Des Weiteren wurde
durch die Ptch Deletion ein schwerer Defekt der T und B
Zellentwicklung im Thymus und im Knochenmark ausgelöst. Der Defekt
resultiert in einem Verlust von unreifen, peripheren B Zellen und
einem kompletten Verlust der T Zellen im Thymus (Uhmann A et al.,
2006 eingereicht). Zusätzlich wurde nach lokaler Induktion der
Cre-Rekombinase im Muskel der Tiere nach 90 Tagen die Entstehung
von Basaliomen, nicht aber die von RMS oder anderen Defekten
induziert. Weiterhin wurden im Rahmen dieser Arbeit transgene
Mäuse, die eine induzierbare Cre-Rekombinase unter Kontrolle des
murinen Pax7 Promotors exprimieren hergestellt und charakterisiert.
Mit Hilfe dieser Mauslinie sollte Ptch in den konditionellen Ptch
knock-out Mäusen spezifisch in Satellitenzellen (adulte Stammzellen
des Skelettmuskels) deletiert werden. Dadurch sollte der Beweis
erbracht werden, dass RMS aus Satellitenzellen entstehen. Bis zum
Abschluss dieser Arbeit konnte die transgen exprimierte
Cre-Rekombinase in Satellitenzellen nicht aktiviert werden. Dagegen
fand sich eine Aktivierung der Cre-Rekombinase in den Nerven des
Skelettmuskels, in dem der Pax7 Promotor ebenfalls aktiv ist. Daher
könnten die generierten transgenen Mäuse ein neues Modell für die
Untersuchung der Entwicklung und regenerativer Prozesse peripherer
Nerven darstellen. | de |
dc.format.mimetype | application/pdf | de |
dc.language.iso | ger | de |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/ | de |
dc.title | Der Hedgehog Rezeptor Patched bei der Tumorentstehung und in der Hämatopoese | de |
dc.type | doctoralThesis | de |
dc.title.translated | The Hedgehog receptor Patched in tumorigenesis and hematopoesis | de |
dc.contributor.referee | Engel, Wolfgang Prof. Dr. | de |
dc.date.examination | 2006-07-06 | de |
dc.subject.dnb | 610 Medizin, Gesundheit | de |
dc.subject.gok | MED 424 Onkologie | de |
dc.subject.gok | MED 417 Hämatologie | de |
dc.subject.gok | MED 340 Immunologie / Allergologie / Umweltmedizin / Medizinische Ökologie (Allgemein- und Gesamtdarstellungen) | de |
dc.description.abstracteng | In contrast to homozygous mutations
heterozygous germline mutations of the Sonic Hedgehog (Shh)
receptor Patched (Ptch) are not lethal and predispose with a high
incidence to the formation of basal cell carcinomas (BCC),
medulloblastomas (MB) and rhabdomyosarcomas (RMS). Since somatic
biallelic inactivation of Ptch is essential for the development of
BCC, Ptch is thought to be a tumor suppressor gene. However,
recently it has been shown that monoallelic loss of Ptch is
sufficient for formation of RMS and MB. The goal of this PhD work
was to analyse the pathogenesis of Ptch-associated RMS in more
detail. In addition the attempt was made to identify the cell of
orgin of these tumors. At first we were able to show that the
formation of RMS in heterozygous Ptchneo67/+ mice can be explained
by an imbalance of the expression levels of the mutant and the
wildtype (wt) Ptch allele. In this context the expression of the
mutant allele is increased, whereas the expression of the wt allele
is decreased in RMS. To verify this observation, different splice
variants of Ptch from RMS tissue were analysed. Next, it was shown
that the Shh/Ptch signalling pathway can be activated both by
expression of the mutant Ptch protein and by reduction of wt Ptch.
Based on these results a model for the development of
Ptch-associated RMS was proposed, in which tumor formation is
induced by an inactivating mutation of one Ptch allele and the
additional silencing of the remaining allele (Uhmann A et al.,
2005). A more detailed analysis of the development of
Ptch-associated tumors included the characterization of a mutant
mouse line that allows for deletion of Ptch in a conditional,
biallelic manner in adult mice. Using an inducible Cre-recombinase
Ptch was ubiquitously inactivated in adult mice. Within a short
time this led to hyperproliferative changes of the skin, of the
gastro-intestinal tract and of the mesenterium. Furthermore,
deletion of Ptch induced a severe defect of T and B cell
development in thymus and bone marrow. This defect resulted in a
depletion of immature peripheral B cells and in a complete loss of
T cells in the thymus (Uhmann A et al., 2006). In addition, the
local induction of the Cre-recombinase activity in the muscle
induced the development of BCC after 90 days, but not of RMS or
other defects. Beyond, transgenic mouse lines were established and
characterized that express an inducible Cre-recombinase under the
control of the murine Pax7 promotor. Using the conditional Ptch
knock-out model, these mouse lines should help to delete Ptch
specifically in satellite cells (adult stem cells of the skeletal
muscle). This aproach should supply evidence that RMS develop from
satellite cells. Until now it was not possible to activate the
Cre-recombinase in satellite cells. However, an activation of the
Cre-recombinase was detected in neural structures of the skeletal
muscle, in which the Pax7 promotor is also active. Hence the
established transgenic mice could possibly serve as a new model for
analysing development und regenerative processes of peripheral
nerves. | de |
dc.contributor.coReferee | Kramer, Wilfried Prof. Dr. | de |
dc.contributor.thirdReferee | Oppermann, Martin Prof. Dr. | de |
dc.subject.topic | Mathematics and Natural Science | de |
dc.subject.ger | Rhabdomyosarcom | de |
dc.subject.ger | Patched | de |
dc.subject.ger | Hämatopoese | de |
dc.subject.eng | Rhabdomyosarcoma | de |
dc.subject.eng | Patched | de |
dc.subject.eng | hematopoesis | de |
dc.subject.bk | 44.81 Onkologie | de |
dc.subject.bk | 44.86 Hämatologie | de |
dc.subject.bk | 44.45 Immunologie | de |
dc.subject.bk | 42.13 Molekularbiologie | de |
dc.identifier.urn | urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1408-5 | de |
dc.identifier.purl | webdoc-1408 | de |
dc.identifier.ppn | 527356174 | de |