Funktionelle Charakterisierung des humanen Organische-Anionen-Transporters 4 (hOAT4)

Stein, Daniel

dc.contributor.advisor	Hagos, Yohannes Prof. Dr.
dc.contributor.author	Stein, Daniel
dc.date.accessioned	2018-03-02T15:44:19Z
dc.date.available	2018-03-16T23:50:05Z
dc.date.issued	2018-03-02
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-002E-E375-3
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.53846/goediss-6746
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.53846/goediss-6746
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.53846/goediss-6746
dc.language.iso	deu	de
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subject.ddc	610	de
dc.title	Funktionelle Charakterisierung des humanen Organische-Anionen-Transporters 4 (hOAT4)	de
dc.type	doctoralThesis	de
dc.title.translated	Functional characterization of human renal organic anion transporter 4 (hOAT4)	de
dc.contributor.referee	Hagos, Yohannes Prof. Dr.
dc.date.examination	2018-03-06
dc.description.abstractger	In der vorliegenden Arbeit werden Triebkräfte und Transportmodus des humanen Organische-Anionen-Transporters 4 untersucht und dessen potentielle physiologische Rolle diskutiert. Dafür wurden Transportexperimente an stabil transfizierten HEK-Zellen wie auch an Xenopus laevis-Oozyten durchgeführt. Die Transportvorgänge wurden dabei sowohl mittels radioaktiv markierter Substrate als auch mit Fluoreszenzfarbstoffen untersucht. Außerdem wurde eine elektrophysiologische Untersuchung durchgeführt. Es konnte gezeigt werden, dass stabil transfizierte HEK-Zellen als Expressionssystem für hOAT4, gekoppelt mit der Tracersubstanz 6-Carboxyfluorescein, verlässliche Daten liefern. Damit ist ein Versuchsaufbau etabliert worden, der die weitere Untersuchung von hOAT4 effektiv und sicher erlaubt. Die vorgelegten Daten erbringen den Beweis, dass hOAT4 ein Urat-Transporter ist, der elektroneutral als asymmetrischer Austauscher arbeitet. Dabei werden einige Substrate wie Esteronsulfat und Urat nur von der extrazellulären Seite akzeptiert. Andere Daten zeigen, dass diese Urat-Aufnahme durch die Sekretion des Diuretikums Hydrochlorothiazid erhöht ist. In der Zusammenschau könnte hOAT4 in vivo daher an der Entstehung der Hydrochlorothiazid-assoziierten Hyperurikämie beteiligt sein. Weiterhin wird dokumentiert, dass die hOAT4-vermittelte Aufnahme von Esteronsulfat und 6-Carboxyfluorescein durch auswärts gerichtete Gradienten von PAH und Glutarat sowie OH-- und Cl--Ionen trans-stimuliert wird. Auch lassen die vorgelegten Daten eine funktionelle Koppelung von hOAT4 mit NHE3 wahrscheinlich erscheinen. Daraus geschlussfolgert repräsentiert hOAT4 den lange postulierten, apikalen, niedrig affinen Urat/OH-- bzw. Urat/Cl-- Austauscher, welcher einen physiologisch relevanten Urat-Transport durchführt und für die postsekretorische Reabsorption von Urat aus dem Primärharn verantwortlich sein könnte.	de
dc.description.abstracteng	In this thesis the driving forces and transport mode of human organic anion transporter 4 are investigated and its potential physiological role is discussed. Transport experiments with stably transfected human epithelial kidney cells as well as with RNA-injected oocytes from Xenopus laevis ovaries were carried out. Transport processes were measured using radioactively marked substrates and fluorescent dyes. Furthermore an electrophysiological study was conducted. Stably transfected human epithelial kidney cells as expression system for hOAT4 combined with the tracing substrate 6-carboxyfluorescein yielded reliable results. With this experimental setup established an effective and safe investigation of hOAT4 is possible. The data presented provide sufficient evidence that hOAT4 is a urate transporter that operates electroneutrally as an asymmetric exchanger. Substrates such as estrone sulfate and urate are being accepted only from the extracellular side. This urate uptake is increased by secretion of the diuretic hydrochlorothiazide, as shown elsewhere. In the synopsis of this hOAT4 may in vivo be involved in hydrochlorothiazide-associated hyperuricemia. Moreover it is shown that hOAT4-mediated uptake of estrone sulfate and 6-carboxyfluorescein is trans-stimulated by an outwardly directed gradient of PAH and glutarate as well as OH- and Cl--ions. The data presented also reveal a probable functional connection of hOAT4 and NHE3. In conclusion hOAT4 represents the long-postulated apical low-affinity urate/OH-- respectively urate/Cl-- exchanger, which mediates physiologically relevant urate transport and may be responsible for the postsecretory reabsorption of urate from primary urine.	de
dc.contributor.coReferee	Asif, Abdul Rahman Prof. Dr.
dc.subject.ger	humaner Organische-Anionen-Transporter 4	de
dc.subject.ger	hOAT4	de
dc.subject.ger	OAT	de
dc.subject.ger	OCT	de
dc.subject.ger	Urat-Transporter	de
dc.subject.eng	human organic anion transporter 4	de
dc.subject.eng	hOAT4	de
dc.subject.eng	OAT	de
dc.subject.eng	OCT	de
dc.subject.eng	urate transporter	de
dc.identifier.urn	urn:nbn:de:gbv:7-11858/00-1735-0000-002E-E375-3-1
dc.affiliation.institute	Medizinische Fakultät	de
dc.subject.gokfull	Physiologie / Pathophysiologie - Allgemein- und Gesamtdarstellungen (PPN619875283)	de
dc.description.embargoed	2018-03-16
dc.identifier.ppn	101517311X

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Human- und Zahnmedizin [2872]

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