NF-kB c-Rel in Fibroblasten und Fibrose
NF-kB c-Rel in fibroblasts and fibrosis
von Franziska Susanne Trautschold-Krause
Datum der mündl. Prüfung:2020-08-13
Erschienen:2020-07-29
Betreuer:Prof. Dr. Michael P. Schön
Gutachter:Prof. Dr. Michael P. Schön
Gutachter:Prof. Dr. Markus Bohnsack
Gutachter:Prof. Dr. Thomas Meyer
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http://dx.doi.org/10.53846/goediss-8134
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Zusammenfassung
Englisch
The incurable systemic sclerosis results from permanent myofibroblast activity and the associated overproduction of ECM proteins. The central question of this work was whether inhibition of individual NF-κB subunits could be used as a target for therapy against uncontrolled myofibroblast differentiation. The analyses of this work were based on an in vitro model, whose functionality was confirmed by the induction of fibrosis-associated parameters. The NF-κB subunit c-Rel was induced at both the transcriptional and translational level, suggesting that c-Rel influences fibrosis-associated characteristics. Functional siRNA suppression of c-Rel was performed under both, homeostatic conditions to study the function of c-Rel in normal fibroblasts and under fibrotic conditions to identify fibrosis associated functions. Cell viability was only slightly different under both conditions. Tendential differences existed with regard to the expression of central fibrosis associated proteins as collagen l. In organotypic (dermis-equivalent) collagen matrices a clearly reduced contractility of c-Rel-suppressed fibroblasts could be shown. This effect was more prominent under homeostatic conditions than under fibrotic conditions. Overall, the expression of c-Rel was induced under fibrotic conditions. Effects of c-Rel on ECM production and cell contractility were shown. Therefore, c-Rel suppression could serve as a target for a therapeutic reduction of fibrosis.
Keywords: fibrosis; fibroblasts; myofibroblasts; c-Rel; systemic sclerosis; NF-κB
Deutsch
Die nicht heilbare systemische Sklerose resultiert aus permanenter Myofibroblasten-Aktivität und der damit verbundenen übermäßigen Produktion von EZM-Proteinen. Die zentrale Fragestellung dieser Arbeit war, ob eine Hemmung einzelnerNF-κB-Untereinheiten als Angriffspunkt einer Therapie gegen die unkontrollierte Myofibroblasten-Differenzierung dienen könnte. Die Analysen dieser Arbeit erfolgten auf Basis eines In-vitro-Modells, dessen Funktionalität anhand der Induktion fibroseassoziierter Parameter bestätigt wurde. Die NF-κB-Untereinheit c-Rel war sowohl auf Transkriptions- als auch auf Translationsebene induziert, was einen Einfluss von c-Rel auf fibroseassoziierte Charakteristika nahelegte. Die darauf aufbauende funktionelle siRNA-Suppression von c-Rel erfolgte sowohl unter homöostatischen Bedingungen zur Untersuchung der Funktion von c-Rel in normalen Fibroblasten als auch unter fibrotischen Bedingungen, um fibroseassoziierte Funktionen identifi-zieren zu können. Die Zell-Viabilität war bei beiden Konditionen lediglich geringfügig verschieden. Tendenzielle Unterschiede bestanden hinsichtlich der Expression zentraler fibroseassoziierter Proteine wie Kollagen l. In organotypischen (dermisäquivalenten) Kollagen-Matrizen konnte eine deutlich und signifikant reduzierte Kontraktilität von c-Rel-supprimierten Fibroblasten gezeigt werden. Dieser Effekt war unter homöostatischen Bedingungen stärker ausgeprägt als unter fibrotischen. Insgesamt wurde die Expression von c-Rel unter fibrotischen Bedingungen induziert und Einflüsse von c-Rel auf die EZM-Produktion und die Zell-Kontraktilität wurden gezeigt. Deshalb könnte die c-Rel-Suppression als Ansatzpunkt zur therapeutischen Fibrosereduktion dienen.
Schlagwörter: Fibrose; Fibroblasten; c-Rel; Systemische Sklerodermie; Myofibroblasten; NF-κB