Einfluss von YAP auf die Invasion von mesenchymal transformierten Tumorzellen
Influence of YAP on the invasion of mesenchymal transformed tumor cells
by Lena Goetz
Date of Examination:2021-01-13
Date of issue:2021-01-13
Advisor:Prof. Dr. Carsten Gründker
Referee:Prof. Dr. Detlef Haase
Referee:Prof. Dr. Margarete Schön
Persistent Address:
http://dx.doi.org/10.53846/goediss-8388
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Abstract
English
Breast cancer is the most common cancer in women worldwide. In the metastatic stage, breast cancer is no longer curable and mortality is high. Therefore, research into the metastatic pathways and ways of influencing them is of great importance. In the present work, the influence of a reduced YAP expression on the invasiveness of the mesenchymally transformed breast cancer cells MDA-MB-231 and MCF-7-EMT was investigated. The successful knockdown of YAP was proven using qPCR and Western blot. The invasiveness of the tumor cells was investigated using a modified Boyden chamber and a coculture system with the osteosarcoma cell line MG-63. Furthermore, the influence of YAP on the proliferation of the cells was investigated. The effect of reduced YAP expression on the cytoskeleton of the cell was examined using the ability to polymerize F-actin. The effect of the knockdown of YAP on the expression of S100A4 was examined using qPCR and Western blot. It could be shown that the invasiveness of YAP after knockdown is significantly reduced, while there is no influence on the proliferation of the cells. The expression of S100A4 was also significantly reduced after the knockdown of YAP. These results show that YAP plays an important role in the metastasis of breast cancer cells. The exact mechanisms of the effect of YAP and its downstream target S100A4 as well as the possibility of using this as atarget in the therapy of metastatic breast cancer must be investigated in further studies.
Keywords: breast cancer; YAP; EMT; metastasis; tumor
German
Brustkrebs ist weltweit die häufigste Krebsart bei Frauen. Im metastasierten Stadium ist der Brustkrebs nicht mehr heilbar und es besteht eine hohe Letalität. Daher ist die Erforschung der Metastasierungswege und Möglichkeiten darauf Einfluss zu nehmen von großer Bedeutung. In der vorliegenden Arbeit wurde der Einfluss einer reduzierten YAP-Expression auf die Invasivität von den mesenchymal transformierten Mammakarzinomzellen MDA-MB-231 und MCF-7-EMT untersucht. Der erfolgreiche knockdown von YAP wurde mittels qPCR und Western Blot nachgewiesen. Die Invasiviät der Tumorzellen wurde mithilfe einer modifizierten Boyden-Kammer und einem Kokultur-System mit der Osteosarkom-Zelllinie MG-63 untersucht. Des Weiteren wurde der Einfluss von YAP auf das Proliferationsverhalten der Zellen untersucht. Die Auswirkung einer verminderten YAP-Expression auf das Zytoskelett der Zelle wurde anhand der Fähigkeit zur F-Aktin-Polymerisation untersucht. Der Effekt des knockdown von YAP auf die Expression von S100A4 wurde anhand von qPCR und Western Blot untersucht. Es konnte gezeigt werden, dass die Invasivität nach knockdown von YAP signifikant vermindert ist, während es keinen Einfluss auf die Proliferation der Zellen gibt. Auch die Expression von S100A4 war nach dem knockdown von YAP signifikant vermindert. Diese Ergebnisse zeigen, dass YAP eine wichtige Rolle in der Metastasierung von Mammakarzionzellen spielt. Die genauen Mechanismen der Wirkung von YAP und seinem downstream target S100A4 sowie die Möglichkeit dies als Angriffspunkt in der Therapie des metastasierten Mammakarzinoms zu Nutzen, müssen in weiteren Studien untersucht werden.
Schlagwörter: Brustkrebs; Metastasierung; YAP; EMT