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dc.contributor.advisor Schäfer, Mireille Prof. Dr. de
dc.contributor.author Schreiter, Kay de
dc.date.accessioned 2012-04-16T14:46:56Z de
dc.date.available 2013-01-30T23:50:42Z de
dc.date.issued 2002-12-04 de
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-AC0E-7 de
dc.description.abstract Protein-RNA Wechselwirkungen sind entscheidend für die Expressionskontrolle auf Translationsebene. Ziel dieser Arbeit war es, im Modellsystem Drosophila-Spermatogenese solche Interaktionen zu charakterisieren und näher zu spezifizieren. Dies wird in verschiedenen Aspekten dargestellt. Das Gen don juan wird in männlichen Keimzellen exprimiert und die mRNA unterliegt der Translationsrepression bis zum Stadium der elongierten Spermatiden. Diese wird durch den 5' nicht-translatierten Bereich (UTR) vermittelt. In der vorliegenden Arbeit wurde gezeigt, daß ein 60 Nukleotide-Fragment aus dem 5' UTR mit Testes-Proteinen interagiert. Dabei werden in "Electrophoretic mobility shift assays" fünf Komplexe mit unterschiedlicher Stabilität ausgebildet. Die Ausbildung der Komplexe ist gewebespezifisch. Der eingegrenzte Bereich der mRNA bildet eine stabile Sekundärstrukur in Form eines stem-loops mit einem terminalen und zwei internen loops aus. In UV-Crosslinking-Experimenten bindet ein einzelnes 62 kDa Protein innerhalb der stem-loop Struktur. Eine hohe Sequenzähnlichkeit dieser Region besteht mit dem TCE ("translational control element") der Drosophila Mst(3)CGP-Genfamilie, welches Translationskontrolle während der Spermatogenese vermittelt. Diesem Bereich kommt jedoch keine Bedeutung bei der don juan-Regulation zu. Die Identifizierung möglicher Kandidaten RNA-bindender Proteine, welche an das TCE der Mst87F-mRNA binden, wird im zweiten Teil dargestellt. In einem "Northwestern-Screening"-Experiment wurde das Drosophila La-Protein isoliert. In dieser Arbeit wird gezeigt, daß die Expression des Drosophila La-Gens in späten prämeiotischen Stadien erfolgt. Ein La-Fusionsprotein aus einem Retikulocytenlysat kann an ein TCE enthaltenes in vitro-Transkript binden. Hemizygote Männchen der Drosophila melanogaster Linie ms(1)bbl-a enthalten keine Keimbahnzellen in den Hodenschläuchen und sind steril. Das BBL-A-Protein ist evolutiv hoch konserviert und gehört zu einer neuen Familie von KH-Domänen-Proteinen. RNAi-Experimente mit dem C. elegans Homolog werden hier vorgestellt. Diese zeigen, dass eine Verminderung der BBL-A Informtion zu einem starken postembryonalen Phänotyp führen. Neben einem Vulva-Defekt ist die Keimzellproliferation und - differenzierung massiv gestört. Die Gonadenarme enthalten fast keine Keimzellen. Die Tiere sind steril. Die Übereinstimmung der mutanten Phänotypen lassen auf eine funktionelle Homologie beider Proteine schließen. de
dc.format.mimetype application/pdf de
dc.language.iso ger de
dc.rights.uri http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm de
dc.title Aspekte der Translationskontrolle in der Drosophila-Spermatogenese: Charakterisierung regulatorischer Elemente de
dc.type doctoralThesis de
dc.title.translated Aspects of translational control in the Drosophila-spermatogenesis: characterization of regulatory elements de
dc.contributor.referee Schäfer, Mireille Prof. Dr. de
dc.date.examination 2002-01-29 de
dc.subject.dnb 570 Biowissenschaften, Biologie de
dc.description.abstracteng Protein-RNA interactions are essential in the control of translation during cell differentiation in many organisms. The goal of this work was to characterize such interaction during spermatogenesis in the Drosophila system. This was done in three different ways. The don juan gene is expressed in male germ cells. During meiotic stages and early spermatid stages don juan mRNA is translationally repressed. This is mediated through the 5' untranslated region (UTR). In this work it is shown that in gel retardation assays 60 nucleotides (nt) at the end of the 5' UTR form five major complexes only with proteins extracted from testes. This region forms a stable stem-loop RNA secondary structure. In UV-crosslinking studies a single 62 kDa protein is shown to bind specifically to the same region within the 5' UTR. The sequence shows a high homology to the translational control element (TCE), described earlier for all members of the Mst(3)CGP gene family, but with no significance in don juan regulation. The identification of possible RNA-binding proteins which interact with the TCE of the Mst87F mRNA is described in the second part. In a northwestern screening experiment the Drosophila La-protein is identified. This work shows that the La-protein can bind to a TCE-containig transcript. Hemizygous males in the Drosophila line ms(1)bbl-a are containing no germ cells and are steril. The BBL-A protein is evolutionary highly conserved and is a member of a new family of KH-domain proteins. RNAi experiments with the C. elegans homolog of bbl-a are described here. These show that a downregulation of the homolog causes a strong postembryonic phenotyp. The germ cell proliferation and differentiation are affected. The gonad contains nearly no germ cells. This is evidence for functional homology. de
dc.contributor.coReferee Hardeland, Rüdiger Prof. Dr. de
dc.subject.topic Mathematics and Computer Science de
dc.subject.ger Drosophila de
dc.subject.ger Spermatogenese de
dc.subject.ger Translationskontrolle de
dc.subject.ger RNA-bindende Proteine de
dc.subject.eng Drosophila de
dc.subject.eng spermatogenesis de
dc.subject.eng translational control de
dc.subject.eng RNA-binding proteins de
dc.identifier.urn urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1226-4 de
dc.identifier.purl webdoc-1226 de
dc.affiliation.institute Biologische Fakultät inkl. Psychologie de
dc.subject.gokfull WF de
dc.subject.gokfull WK de
dc.identifier.ppn 358120233

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