Charakterisierung der subzellulären Lokalisation von Myelinproteinen in der Shiverer-Maus.

Abstract

Wie demyelinisierende Erkrankungen bei Mensch und Tier zeigen, erfüllt Myelin als Isolierscheide der Nervenfasern lebenswichtige Funktionen. Es handelt sich um eine Membran sehr spezifischer Zusammensetzung, deren Komponenten in komplexer Wechselwirkung mit einander stehen. Die vorliegende Arbeit betrachtet die Verteilung von Myelinproteinen in der Mausmutante Shiverer, welche das Myelin Basische Protein (MBP) nicht synthetisieren kann. Mittels Immunofluoreszenzfärbung von Gehirn-Gefrierschnitten konnte gezeigt werden, dass in adulten Shiverer-Mäusen die Myelinproteine PLP (Proteolipidprotein), MAG (Myelin assoziiertes Glykoprotein) und MOG (Myelin Oligodendrozyten Glykoprotein) in deutlichem Ausmaß vesikulär perinukleär lokalisiert sind, während diese Verteilung im adulten Wildtyp kaum zu finden ist. Das Phänomen findet sich im Wildtyp allerdings in einem frühen, zeitlich begrenzten Rahmen, vor allem um den 14. postnatalen Tag. Die Vesikel-tragenden Zellen konnten als Oligodendrozyten identifiziert werden, die Vesikel partiell als späte Endosomen/Lysosomen. Mittels CHAPS-Extraktionsexperimenten mit Gehirnhomogenisat adulter Shiverer- und Wildtyp-Mäuse konnte die Umverteilung der Proteine PLP, MAG und MOG in der Shiverer-Maus bestätigt werden. Für das Protein CNP des nicht-kompakten Myelins fanden sich diese Differenzen zwischen Wildtyp und Shiverer mit keiner der beiden experimentellen Methoden. Um einen unspezifischen Effekt aufgrund schwerer Dysmyelinisierung auszuschließen, wurden die vergleichenden Immunofluoreszenzfärbungen an Gefrierschnitten der Squalen-Synthase-Knockout-Maus wiederholt. Die konditionale Mutante, in welcher Oligodendrozyten nicht zur Cholesterol-Synthese fähig sind, zeigte das beschriebene Phänomen in kaum stärkerem Ausmaße als Wildtyp-Mäuse.