Funktionelle Charakterisierung von Substitutionsmutationen in Position 566 der Linker-Domäne des onkogenen Transkriptionsfaktors STAT3

Bohne, Niklas Matthias

dc.contributor.advisor	Meyer, Thomas Prof. Dr.
dc.contributor.author	Bohne, Niklas Matthias
dc.date.accessioned	2023-06-08T09:46:43Z
dc.date.available	2023-06-27T00:50:10Z
dc.date.issued	2023-06-08
dc.identifier.uri	http://resolver.sub.uni-goettingen.de/purl?ediss-11858/14709
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.53846/goediss-9923
dc.format.extent	VII, 79	de
dc.language.iso	deu	de
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.subject.ddc	610	de
dc.title	Funktionelle Charakterisierung von Substitutionsmutationen in Position 566 der Linker-Domäne des onkogenen Transkriptionsfaktors STAT3	de
dc.type	doctoralThesis	de
dc.contributor.referee	Meyer, Thomas Prof. Dr.
dc.date.examination	2023-06-20	de
dc.description.abstractger	In dieser Arbeit wurde die Rolle zweier Missense-Mutationen in Position 566 des humanen Transkriptionsfaktors STAT3 (Signaltransduktor und Aktivator der Transkription) in Bezug auf die Aktivierung des JAK/STAT-Signalwegs nach Zytokinstimulation untersucht. STAT3 ist physiologischerweise unter anderem in die Modulation von Immunantworten sowie der Zellproliferation eingebunden. Mutationen in Mitgliedern der STAT-Familie sind mit diversen pathologischen Prozessen vergesellschaftet, wobei Mutationen im STAT3-Protein insbesondere mit dem Hyper-IgE-Syndrom assoziiert sind. Aufgrund großer struktureller Ähnlichkeiten zwischen dem STAT1- und dem STAT3-Protein wurde bei bereits bekanntem Phänotyp der homologen STAT1-E559A-Punktmutation der Einfluss der Aminosäure Asparaginsäure in Position 566 im STAT3-Molekül auf dessen Phosphorylierungskinetik, Kernakkumulation, DNA-Bindeaffinität und die transkriptionelle Aktivität untersucht. Es wurden mittels sequenzspezifischer Mutagenese die Missense-Mutationen D566A und -D566N in die Linker-Domäne des STAT3-Moleküls eingebracht. Beide Substitutionsmutanten zeigten keine Veränderung bezüglich ihrer Phosphorylierungskinetik und keine prolongierte Kernakkumulation. Ebenso konnte mittels einer radioaktiv markierten, hochaffinen GAS-Sequenz ein weitgehend regelhaftes DNA-Bindeverhalten der STAT3-D566A sowie -D566N beobachtet werden. Allein in der Real-time PCR konnte eine dezent erhöhte Zielgen-aktivierung nachgewiesen werden. In Zusammenschau der Ergebnisse wird davon ausgegangen, dass sowohl STAT3-D566A wie auch STAT3-D566N keine signifikanten phänotypischen Veränderungen gegenüber dem STAT3-Wildtyp aufweisen, was eine entscheidende Rolle in der Pathogenese des Hyper-IgE-Syndroms eher unwahrscheinlich werden lässt.	de
dc.description.abstracteng	In this work, the role of two missense mutations in position 566 of the human transcription factor STAT3 (signal transducer and activator of transcription) in relation to the activation of the JAK/STAT signalling pathway after cytokine stimulation was investigated. STAT3 is physiologically involved in the modulation of immune responses as well as cell proliferation, among other things. Mutations in members of the STAT family are associated with various pathological processes, whereby mutations in the STAT3 protein are particularly associated with the hyper-IgE syndrome. Due to large structural similarities between the STAT1 and STAT3 proteins, the influence of the amino acid aspartic acid in position 566 in the STAT3 molecule on its phosphorylation kinetics, nuclear accumulation, DNA binding affinity and transcriptional activity was investigated in the already known phenotype of the homologous STAT1-E559A point mutation. Sequence-specific mutagenesis was used to introduce the missense mutations D566A and -D566N into the linker domain of the STAT3 molecule. Both substitution mutants showed no change with regard to their phosphorylation kinetics and no prolonged nuclear accumulation. Likewise, a largely regular DNA-binding behaviour of STAT3-D566A as well as -D566N could be observed by means of a radioactively labelled, high-affinity GAS sequence. Only in real-time PCR could a subtly increased target gene activation be detected. In summary of the results, it is assumed that both STAT3-D566A and STAT3-D566N show no significant phenotypic changes compared to the STAT3 wild type, which makes a decisive role in the pathogenesis of the hyper-IgE syndrome rather unlikely.	de
dc.contributor.coReferee	Lutz, Susanne Prof. Dr.
dc.subject.ger	STAT3	de
dc.subject.ger	STAT	de
dc.subject.eng	STAT3	de
dc.subject.eng	STAT3-D566A	de
dc.subject.eng	STAT3-D566N	de
dc.subject.eng	Linker domain	de
dc.subject.eng	Missens mutation	de
dc.identifier.urn	urn:nbn:de:gbv:7-ediss-14709-8
dc.affiliation.institute	Medizinische Fakultät	de
dc.subject.gokfull	Physiologie / Pathophysiologie - Allgemein- und Gesamtdarstellungen (PPN619875283)	de
dc.subject.gokfull	Biochemie {Medizin} (PPN619875321)	de
dc.description.embargoed	2023-06-27	de
dc.identifier.ppn	1848738641
dc.notes.confirmationsent	Confirmation sent 2023-06-08T10:15:01	de

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Human- und Zahnmedizin [2880]

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