Der Einfluss von GnRH-Analoga auf die Zellproliferation und die GPR-30-Expression in triple negativen Mammakarzinomzellen

Beer, Eva-Maria

dc.contributor.advisor	Gründker, Carsten Prof. Dr.
dc.contributor.author	Beer, Eva-Maria
dc.date.accessioned	2021-08-11T14:30:10Z
dc.date.available	2021-09-08T00:50:30Z
dc.date.issued	2021-08-11
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/21.11130/00-1735-0000-0008-58DC-E
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.53846/goediss-8754
dc.language.iso	deu	de
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subject.ddc	610	de
dc.title	Der Einfluss von GnRH-Analoga auf die Zellproliferation und die GPR-30-Expression in triple negativen Mammakarzinomzellen	de
dc.type	doctoralThesis	de
dc.title.translated	The effect of GnRH-analogs on cell proliferation and expression of the GPR30 in triple negative breast cancer cells	de
dc.contributor.referee	Gründker, Carsten Prof. Dr.
dc.date.examination	2021-09-01
dc.description.abstractger	Triple negative Mammakarzinom Zellen (TNBC-Zellen) besitzen weder einen Östrogenrezeptor α, noch einen Progesteronrezeptor, noch exprimieren sie den Her-2 Rezeptor über. Aktuell gibt es keine spezifische Therapie. TNBC-Zellen exprimieren häufig den EGF-1-Rezeptor (Epidermal Growth Faktor-Rezeptor-1), den membrangebundenen Östrogenrezeptor (GPR30) sowie den GnRH-Rezeptor (Gonadotropin-Releasing Hormon-Rezeptor). GnRH-Analoga binden an den GnRH-Rezeptor der Tumorzelle, dadurch wird eine Protein-Tyrosin Phosphatase (PTP) aktiviert, welche die Autophosphorylierung und somit die Aktivierung des EGF-Rezeptors hemmt. Dadurch wird die mitogene Signaltransduktion und die Zellproliferation gehemmt. Durch die bekannte Korrelation zwischen dem EGFR (Epidermal Growth Faktor Rezeptor) und dem GPR30 lässt sich eine Reduktion der GPR30-Expression durch GnRH-Analoga erklären. Ziel der Arbeit war es herauszufinden, welches der GnRH-Analoga die größtmögliche Hemmung der durch 17ß-Östradiol ausgelösten Proliferationssteigerung bewirkt und inwieweit sich die GPR30-Expression unter der Behandlung mit GnRH-Analoga verändert. Verwendet wurden die GnRH- Analoga: Triptorelin (GnRH-I-Agonist), Cetrorelix (GnRH-I-Antagonist), D-Lysin6GnRH II Agonist (GnRH-II-Agonist), GnRH-II-Antagonist (N4 GnRH-II-Antagonist) Zunächst erfolgte mittels Alamar Blue Assay der Nachweis, dass eine Zellproliferationssteigerung in TNBC-Zellen, durch Bindung von 17ß-Östradiol an den GPR30 (um bis zu 24%) möglich ist. Die Proliferationshemmende Wirkung von GnRH-Analoga auf (zuvor mit 17ß-Östradiol stimulierte) TNBC-Zellen wurde mittels Alamar Blue Assay untersucht. Es zeigte sich, dass bei den Zelllinien HCC70 und HCC1806 eine signifikante Reduktion der Proliferationsrate durch den GnRH-I-Antagonisten Cetrorelix erreicht werden konnte. Im Folgenden wurde der GPR30 als vermutetes Therapie-Target weiter untersucht. Mittels Western Blot wurde die Reduktion der GPR30-Expression unter Cetrorelix zeit- und dosisabhängig ermittelt. Dabei ergab sich bei der höchsten Konzentration von Cetrorelix (10-5 M) bei beiden Zelllinien eine signifikante Hemmung der GPR30-Expression, unabhängig von der Zeit. Bei der längsten Inkubationszeit von 96 h zeigte sich eine signifikante Hemmung der GPR30-Expression unabhängig von der Cetrorelixkonzentration. Die Ergebnisse der Arbeit zeigen, dass die Reduktion der GPR30-Expression durch den GnRH-I Antagonist Cetrorelix eine vielversprechende Herangehensweise für die Therapie des triple negativen Mammakarzinoms ist.	de
dc.description.abstracteng	Triple-negative breast cancers lack estrogen receptor α (ERα), progesterone receptor, and do not overexpress human epidermal growth factor receptor 2 (Her-2). Currently there is no specific target therapy. TNBCs frequently overexpress epidermal growth factor receptor (EGF-1-receptor), membrane bound estrogen receptor (GPR30) and gonadotropin-releasing hormone receptor (GnRH-receptor). GnRH-analogs bind to the GnRH-receptor. Through activation of a protein tyrosine phosphatase, autophosphorylation and activation of epidermal growth factor receptors (EGF-1-receptor) is inhibited. This leads to an inhibition of mitogenic signaling and reduced cell proliferation. A correlation between the EGFR and the GPR30 is known. As a result of this, a reduction of the expression of GPR30 through GnRH- analogs can be explained. We analyzed the impact of GnRH-analogs on the 17ß-estradiol-dependent growth stimulation of TNBC cells and on GPR30 expression in TNBC cells. Therefor the following GnRH-analogs have been used: Triptorelin (GnRH-I-Agonist), Cetrorelix (GnRH-I-Antagonist), D-Lysin6GnRH II Agonist (GnRH-II-Agonist), GnRH-II-Antagonist (N4 GnRH-II-Antagonist). Dependence of cell proliferation on 17β-estradiol in TNBC cells was determined using Alamar Blue assay. In HCC70 cells proliferation was increased by 17ß estradiol to 1,24±0,07 (p<0,05). The decreased cell proliferation of TNBC cells after treatment with GnRH-analogs was investigated usig Alamar Blue assay. The GnRH-antagonist cetrorelix reduced the cell proliferation of HCC70- and HCC1806 cells significantly. The expression of GPR30 was analyzed by western blotting. Cetrorelix reduced GPR30 expression concentrations- and time-dependent. After treatment with Cetrorelix 10-5M the GPR30 expression (in both cell lines) was reduced significantly, time-independent. After treatment with Cetrorelix for 96 hours the GPR30 expression (in both cell lines) was reduced significantly, concentration-independent. These experiments conclusively show that reduction of GPR30 expression through the GnRH-antagonist cetrorelix is a promising therapeutic approach for TNBC.	de
dc.contributor.coReferee	Kube, Dieter Prof. Dr.
dc.subject.ger	GPR30	de
dc.subject.ger	GnRH-Analoga	de
dc.subject.ger	triple negatives Mammakarzinom	de
dc.subject.eng	GPR30	de
dc.subject.eng	GnRH-analogs	de
dc.subject.eng	triple-negative breast cancer	de
dc.identifier.urn	urn:nbn:de:gbv:7-21.11130/00-1735-0000-0008-58DC-E-4
dc.affiliation.institute	Medizinische Fakultät	de
dc.subject.gokfull	Gynäkologie / Geburtshilfe / Perinatologie - Allgemein- und Gesamtdarstellungen (PPN619876050)	de
dc.description.embargoed	2021-09-08
dc.identifier.ppn	1766495788

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Human- und Zahnmedizin [2880]

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