In-ovo-Analysen zur Interaktion von Hodgkin-Lymphomzellen mit Monozyten

Maulhardt, Markus

dc.contributor.advisor	Kube, Dieter Prof. Dr.
dc.contributor.author	Maulhardt, Markus
dc.date.accessioned	2021-10-18T06:48:34Z
dc.date.available	2021-11-21T00:50:03Z
dc.date.issued	2021-10-18
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/21.11130/00-1735-0000-0008-593E-0
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.53846/goediss-8884
dc.language.iso	deu	de
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subject.ddc	610	de
dc.title	In-ovo-Analysen zur Interaktion von Hodgkin-Lymphomzellen mit Monozyten	de
dc.type	doctoralThesis	de
dc.title.translated	In ovo studies on the interaction of Hodgkin lymphoma cells with monocytes	de
dc.contributor.referee	Kube, Dieter Prof. Dr.
dc.date.examination	2021-11-11
dc.description.abstractger	Das klassische Hodgkin-Lymphom (cHL) ist eine aggressive B-Zell-Neoplasie. Trotz außergewöhnlicher Therapie-Ansprechraten führt die aktuelle Strategie der Risikostratifizierung beim cHL dazu, dass ein Teil der Patientinnen über- oder unterbehandelt wird. Die Langzeittoxizität der Therapie steht im Kontrast zur günstigen Prognose des Hodgkin-Lymphoms. Daher liegt eine Dosisreduktion der angewandten Radio-Chemotherapie bei gleichzeitigem Erhalt der Effektivität nahe. Etwa 20 Prozent der Hodgkin-Lymphome sind therapierefraktär oder rezidivieren nach initialer kompletter Remission (r/r), was mit einer drastisch reduzierten Prognose einhergehen kann. Diese Tumorentität ist durch wenige maligne Hodgkin-Reed-Sternberg-Zellen vor dem Hintergrund eines ausgedehnten reaktiven Immuninfiltrates benigner Zellen charakterisiert, wobei Monozyten respektive Makrophagen von prognostischer Bedeutung sind. Deshalb kann die Untersuchung der Mechanismen der vielfältigen Wechselwirkungen von Lymphomzellen und den Zellen ihrer Mikroumgebung, speziell der Makrophagen, von klinischer Relevanz sein. Um herauszufinden, welche Auswirkung eine Ko-Kultur von CD14-positiven (CD14+) peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) mit Hodgkin-Zellen in einem präklinischen Xenograft-Modell hat, wurden Tumoren im Chorion-Allantois-Membran-(CAM)-Assay des befruchteten Hühnereis generiert und nach vier Tagen in ovo geerntet. In diesem neu etablierten CAM-Modell wurden Lymphome der Zelllinie L-428 in An- und Abwesenheit von CD14+-PBMCs untersucht. Mischtumoren aus Lymphomzellen und CD14+-PBMCs führten im Vergleich zu reinen L-428-CAM-Lymphomen zu signifikant kleineren CAM-Läsionen, in denen so gut wie keine Hämorrhagien nachgewiesen werden konnten. Die Mischtumoren hatten eine kugelige, halbrunde Form und zeichneten sich histologisch durch eine dreigliedrige Kompartimentierung aus. Sowohl Lymphomzellen als auch Makrophagen zeigten nach vier Tagen in ovo Migrationsverhalten an den Invasionsfronten zur physiologischen CAM. Eine wichtige Beobachtung war, dass im CAM-Modell histologisch die Expression von CD206 auf CD68-positiven Zellen in Mischtumoren aus L-428-Lymphomzellen mit CD14+-PBMCs nachweisbar war. Dies spricht für einen Lymphom-induzierten Aktivierungs- oder Differenzierungsprozess von den CD14+-PBMCs hin zu alternativ aktivierten M2-ähnlichen Makrophagen und gegebenenfalls sogar hin zu Hodgkin lymphoma-educated macrophages (HEMs). Da CD206 durch zahlreiche endozytotische Prozesse, unter anderem durch Kollagen-Aufnahme, charakterisiert ist, kommt den CD206-exprimierenden tumor-associated macrophages (TAMs) im Hodgkin-Lymphom vermutlich eine Rolle als aktiver Modulator in der Umgestaltung der Lymphom-Mikroumgebung zu. In Zukunft könnte sich CD206 als diagnostischer Biomarker im Hodgkin-Lymphom herausstellen. Vielleicht könnte es auch zur Therapiesteuerung geeignet sein und sich möglicherweise als Zielstruktur für die selektive Hemmung von HEMs erweisen, insbesondere unter dem Eindruck der neu etablierten Immun-Checkpoint-Inhibitoren, welche für Patientinnen mit r/r cHL zugelassen sind.	de
dc.description.abstracteng	Classical Hodgkin lymphoma (cHL) is an aggressive B-cell neoplasm. Despite exceptional treatment response rates, the current strategy of risk stratification in cHL implies a relevant proportion of patients being over- or undertreated. Long-term toxicity resulting from therapy stands in stark contrast to the favourable overall prognosis of Hodgkin lymphoma patients. This suggests a dose reduction of the administered radio-chemotherapy while maintaining its efficacy. About twenty percent of cHL are refractory to therapy or relapse (r/r) after initial complete remission, associated with poor prognosis. This lymphoid malignancy is characterised by sparse Hodgkin-Reed-Sternberg cells embedded in an abundant reactive immune infiltrate of benign cells. Monocytes and macrophages are of prognostic significance. Hence, studying the complex interplay of lymphoma cells and the cells of their microenvironment, especially macrophages, could eventually claim clinical relevance. In order to study the effect of co-culturing CD14-positive (CD14+) peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) with Hodgkin cells in a preclinical xenograft model by using histological methods, tumours in this study were generated in the chorio-allantoic membrane assay (CAM assay) of the fertilised chicken egg and harvested after four days in ovo. In this newly established CAM model lymphomas of the cHL cell line L-428 were studied in presence and absence of CD14+ PBMCs. Compared to pure L-428 CAM lymphomas, mixed tumours of lymphoma cells and CD14+ PBMCs resulted in significantly smaller CAM lesions in which virtually no haemorrhages could be detected. Mixed tumours had a spherical, semicircular shape and were histologically characterised by a tripartite compartmentalisation. Both lymphoma cells and macrophages showed migratory behaviour at the invasion fronts towards the physiological CAM in ovo. An important observation was that CD206 expression was histologically detectable on the surface of CD68-positive cells in mixed tumours of L-428 lymphoma cells and CD14+ PBMCs in our CAM model. This suggests a lymphoma-induced activation or differentiation process from CD14+ PBMCs to alternatively activated macrophages that expose an M2-like phenotype and possibly even to Hodgkin lymphoma-educated macrophages (HEMs). Since CD206 is characterised by numerous endocytic processes including collagen uptake, CD206-expressing tumour-associated macrophages (TAMs) in Hodgkin lymphoma likely have a role as an active modulator in the remodelling of the lymphoma microenvironment. In the future, CD206 could emerge as a diagnostic biomarker in Hodgkin lymphoma. It might be suitable for therapy management as well and possibly could prove to be a target for selective inhibition of HEMs, particularly in the light of the advent of immune checkpoint inhibition approved for patients affected by r/r cHL.	de
dc.contributor.coReferee	Reichardt, Holger Prof. Dr.
dc.subject.ger	Hodgkin-Lymphom	de
dc.subject.ger	Mikroumgebung	de
dc.subject.ger	Monozyten	de
dc.subject.ger	Makrophagen	de
dc.subject.ger	CD206	de
dc.subject.ger	CAM-Assay	de
dc.subject.eng	Hodgkin lymphoma	de
dc.subject.eng	Tumor microenvironment	de
dc.subject.eng	Monocytes	de
dc.subject.eng	Macrophages	de
dc.subject.eng	CD206	de
dc.subject.eng	CAM assay	de
dc.identifier.urn	urn:nbn:de:gbv:7-21.11130/00-1735-0000-0008-593E-0-3
dc.affiliation.institute	Medizinische Fakultät	de
dc.subject.gokfull	Innere Medizin - Allgemein- und Gesamtdarstellungen (PPN619875747)	de
dc.description.embargoed	2021-11-21
dc.identifier.ppn	1774440067

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Human- und Zahnmedizin [2880]

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