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dc.contributor.advisor Engel, Wolfgang Prof. Dr. Dr. de
dc.contributor.author Ahmed, Manal Bayomi Mahmoud de
dc.date.accessioned 2012-04-16T14:46:27Z de
dc.date.available 2013-01-30T23:50:23Z de
dc.date.issued 2002-03-08 de
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-ABE4-9 de
dc.description.abstract In dieser Arbeit untersuchten wir die Potenz der Primordial Keimzellen (PGCs) zur malignen Transformation unter Verwendung eines transgenen Mausmodell. In diesem Modell verwendeten wir das SV40 large Tumor Antigen (LTA),welcher mit dem Keimzellen alkalische Phosphatase (GCAP) Promotor verbunden ist, um direkt die Onkogenische Aktivität von SV40-LTA hinsichtlich PGCs spezifischally zu richten. Menschliche GCAP sich entwicklungsmässig in Primordial Keimzellen und auch in der Entwicklungsphasen vom Zweizellenstadium bis zum Blastozyststadium der Präimplantationsentwicklung ausgedrückt ist, und wieder erscheint in Spurbeträgen in der Erwachsenen Hoden. Weiterhin kommt GCAP im Vorkrebsstadium der Testikular Keimzellen Tumoren vor (carcinoma in situ),und auch in höhen differenzierten Tumoren vor. Wir analysierten die regulierende Sequenz der 5´flankierende Region des menschlichen GCAP Gens,welches Verantwortlich für seine Expression in verschiedenen Testikular Keimzellen Tumoren Verantwortlich ist,um zu beweisen,dass die minimale Promotorregion genügt für eine hohe und gewebespezifische Expression des GCAP. Drei unabhängige transgenetische Linien wurden erzeugt unter Benutzung eines 1.7 kb Fragment 5´flankierende des GCAP Gens als Promotor. Die RT-PCR Analyse zeigte die testisspezifische Expression von LTA in dem erwachsenen heterozygoten und homozygoten transgenetischen Mäusen in geringen Mengen. Weiterhin konnten wir LTA mRNA in 8.5 dpc pränatalen transgenetischen Embryonen entdecken. Wie auch immer,nach einer Periode von 20 Monaten,wurde kein Tumor in einem Organ dieser Mäuse entdeckt. Die Verwendung eines "in vitro" Verfahrens der Analysierung unterschiedlich ausgebildeter Gene in GC-1spg Zellen durch Suppression subtraktiver Hybridizierung (SSH),ein relativ unbekanntes Gen,welches hochentwickelt war in invasiven GC-1spg Zellen identifiziert wurden. Wir bezeichneten dieses Gen Pfcp (PHD-finger ähnlich chromatin proteins) weil die deduzierte Proteinsequenz eine Domäne zeigt,welche bekannt als PHD-finger ähnliche Domäne ist,dafür bekannt ist in die chromatin Bindung integriert zu sein. Die cDNA Sequenz des Pfcp Gens der Maus wurde isoliert und analysiert,wie auch ihre genomische Struktur isoliert und analysiert wurde. Das Expression muster des Maus Pfcp und seine Zellulare und Subzellulare Position wurde bestimmt: Überprüfung einer Mäusecosmidbibliothek und einer genomischen southern blot zeigte das Muster einer Genfamilie welche aus ca.vier verschiedenen murine Pfcp Genen besteht. Northern blot Analysen zeigte ein Transkript von ungefähr 1.2 kb. Die Expression von Pfcp in den unterschiedlichen Mäusegeweben ist überall vorhanden. Die Expressionsanalyse des menschlichen PFCP zeigte auch einen überall vorhandenen Expression. Pfcp wird im Zellkern lokalisiert und bindet an chromatinstrukturen im Interphase und im Metaphase der Zellzyklus. de
dc.format.mimetype application/pdf de
dc.language.iso eng de
dc.rights.uri http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm de
dc.title The susceptibility of primordial germ cells to malignant transformation and isolation and characterization of members of a new gene family differentially expressed in invasive and non-invasive immortalized male germ cells de
dc.type doctoralThesis de
dc.title.translated Die Potenz der Primordialen Keimzellen zur malignen Transformation und Isolierung und Charakterisierung von Mitgliedern einer neuen Genfamilie, die in invasiven immortalisierten Keimzellen überexprimiert sind de
dc.contributor.referee Engel, Wolfgang Prof. Dr. de
dc.date.examination 2002-01-29 de
dc.subject.dnb 570 Biowissenschaften, Biologie de
dc.description.abstracteng In this study, we examined the susceptibility of primordial germ cells (PGCs) to malignant transformation using a transgenic mouse model. In this model we used the simian virus 40 (SV40) large tumor antigen (LTA) fused to the promoter of germ cell alkaline phosphatase (GCAP) to specifically direct the oncogenic activity of SV40-LTA to PGCs. Human GCAP is developmentally expressed in primordial germ cells and also from the 2-cell to blastocyst stage of preimplantation development and reappears in trace amounts in the adult testis. Furthermore, GCAP is reexpressed in precancerous stages of testicular germ cell tumors (carcinoma in situ) and also in more differentiated tumors. We analyzed the regulatory sequences in the 5´-flanking region of human GCAP gene which are responsible for its expression in different testicular germ cell tumors to determine the minimal promoter region sufficient for a high and tissue specific expression of GCAP. Three independent transgenic lines were generated using a fragment of 1.7 kb 5´flanking of the GCAP gene as a promoter. RT-PCR analysis showed testis specific expression of LTA in the adults of heterozygous and homozygous transgenic mice in trace amounts. Furthermore, we could detect LTA mRNA in 8.5 dpc prenatal transgenic embryos. However, even after a period of about 20 months, no tumor was observed in any organ of these mice. Using an "in vitro" approach of analysing differentially expressed genes in GC-1spg cells through suppression subtractive hybridization (SSH), a so far unknown gene which was found to be highly expressed in invasive GC-1spg cells was identified, we named this gene Pfcp (PHD-finger-like chromatin proteins) as the deduced protein sequence shows a domain known as "PHD-finger" like domain, known to be involved in chromatin binding. The cDNA sequence of mouse Pfcp was isolated and analyzed as well as its genomic structure. The expression pattern of mouse Pfcp and its cellular and subcellular location was determined: screening a mouse cosmid library and a genomic Southern blot showed the pattern of a gene family which consists of about four different murine Pfcp genes. Northern blot analysis showed one transcript at approximately 1.2 kb. The expression of Pfcp in different mouse tissues is ubiquitous. The expression analysis of human PFCP showed an ubiquitous expression as well. Pfcp is localized in the nucleus and binds to chromatin structures in interphase and metaphase of the cell cycle. de
dc.contributor.coReferee Hoyer-Fender, Sigrid Prof. Dr. de
dc.subject.ger Primordial Keimzellen (PGCs) de
dc.subject.ger SV40-LTA de
dc.subject.ger Testikular Keimzellen Tumoren de
dc.subject.ger Genfamilie de
dc.subject.eng Primordial germ cells (PGCs) de
dc.subject.eng SV40-LTA de
dc.subject.eng Testicular germ cell tumors de
dc.subject.eng Gene family de
dc.subject.bk 42.13 de
dc.identifier.urn urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1108-9 de
dc.identifier.purl webdoc-1108 de
dc.affiliation.institute Biologische Fakultät inkl. Psychologie de
dc.subject.gokfull WD de
dc.identifier.ppn 344850846

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