Expression von Lymphotaktin (XCL1) bei der Wegener'schen Granulomatose

Abstract

ZIELSETZUNG: Bei den primär systemischen Vaskulitiden/Vaskulitis-Syndromen, wie beispielsweise der Wegener schen Granulomatose (WG), tritt in bis zu 20% der Fälle aufgrund einer rapid progredienten Glomerulonephritis (RPGN) eine terminale Niereninsuffizienz auf. Histopathologisch ist der Befall der Niere durch die Ausbildung von granulomatösen Läsionen mit deutlicher Infiltration von polymorphkernigen neutrophilen Granulozyten (PNG) und T-Lymphozyten charakterisiert. Die Mechanismen, welche zur T-Zell-Aktivierung und -Infiltration führen, sind bislang ungeklärt. Im Rahmen dieser Arbeit wurde die Expression und Funktion von Lymphotaktin (XCL1), einem C-Klasse-Chemokin, in der Pathogenese der Wegener schen Granulomatose untersucht.METHODEN: Serumproben und mononukleäre Zellen des peripheren Blutes (PBMC) wurden von je 16 WG-Patienten und 16 nach Alter und Geschlecht vergleichbaren gesunden Probanden gewonnen. Die XCL1-Serumkonzentrationen wurden mit Hilfe eines ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) bestimmt. Expression der Aktivierungsmarker CD25, CD69 und HLA-DR und der Immunphänotyp von XCL1⁺-T-Zellen wurden mittels Durchflusszytometrie untersucht. Darüber hinaus wurden Nierenbiopsien von fünf WG-Patienten mit immunhistochemischer Doppelmarkierung für XCL1 und die Zelloberflächenantigene CD4, CD8 und CD68 analysiert. Gewebeproben mit benigner Nephrosklerose dienten als Kontrolle. Um die funktionelle Rolle von XCL1 zu untersuchen, wurden polymorphkernige neutrophile Granulozyten (PNG) in vitro mit Lymphotaktin stimuliert und anschließend bezüglich ihrer Interleukin-8-Produktion mit unstimulierten Kontrollen verglichen.ERGEBNISSE: Die Serumkonzentrationen von XCL1 unterschieden sich zwischen WG-Patienten und gesunden Kontrollprobanden nicht signifikant (p=0.5). Durchflusszytometrische Untersuchungen zeigten, dass im Vergleich zu den Kontrollen ein signifikant höherer Anteil der CD4⁺- und CD8⁺-T-Lymphozyten von WG-Patienten eine Koexpression der Aktivierungsmarker CD25, CD69 und HLA-DR aufwies (p<0.05). Weiterhin konnte XCL1 hauptsächlich in den CD4⁺CD28⁻- und CD8⁺CD28⁻-T-Lymphozyten von WG-Patienten detektiert werden. Die Untersuchung der Nierenbiopsien zeigte eine XCL1- Expression in interstitiellen CD4⁺- und CD8⁺-T-Zellen bei WG-assoziierter RPGN, in CD68⁺ Monozyten/Makrophagen hingegen nicht. Die in-vitro-Stimulation der PNG mit XCL1 führte zu einem signifikanten, zeit- und dosisabhängigen Anstieg der IL-8-Produktion.SCHLUSSFOLGERUNG: Diese Ergebnisse weisen darauf hin, dass das C-Klasse-Chemokin Lymphotaktin in Fällen von Wegener scher Granulomatose mit Nierenbeteiligung hauptsächlich in CD4⁺- und CD8⁺-T-Lymphozyten produziert wird. Unter Berücksichtigung der bekannten Funktion von XCL1 als lymphozytenspezifisches Chemoattraktans, könnte XCL1 eine Schlüsselrolle bei der Modulation der T-Zell-Rekrutierung bei WG-assoziierter rapid progressiver Glomerulonephritis spielen. Darüber hinaus lassen die vorgenommenen Funktionsuntersuchungen vermuten, dass XCL1 die vaskuläre Entzündung durch die Induktion vermehrter IL-8-Produktion in polymorphkernigen neutrophilen Granulozyten unterstützen könnte.