Die Organisation von Signalnetzwerken in B-Lymphozyten

Abstract

B-Zell-Antigenrezeptoren (BZR) transduzieren Signale, die sowohl zur Proliferation und Differenzierung als auch zur Apoptose von B-Zellen führen können. Um diese verschiedenen biologischen Reaktionen vermitteln zu können, sind die BZR-abhängigen Signalnetzwerke sehr komplex aufgebaut und auf vielen Ebenen fein reguliert. Die Antigenerkennung führt zur Aktivierung der BZR und bestimmter Kinasen, die wiederum eine Vielfalt an Substraten phosphorylieren und damit eine koordinierte Signaltranduktion bewirken. Ein wesentliches Substrat solcher Kinasen stellt das zytosolische Adapterprotein SLP65 dar. Im Zuge der BZR-Stimulation muss SLP65 zum Zellmembran-gebundenen BZR-Kinase-Komplex rekrutiert werden, um dort selbst aktiviert zu werden. Nach Aktivierung assembliert SLP65 dann an der Zellmembran den sog. Calciuminitiationskomplex, der verschiedene Signalwege aktiviert und damit unabdingbar für eine regelrechte B-Zell-Funktion ist. In meiner Doktorarbeit habe ich die Funktionsweise von SLP65 bezüglich zweier Regulationsmechanismen, nämlich der räumlichen- sowie der post-translationalen Regulation untersucht. Ich konnte mittels proteomischer Methoden zeigen, dass SLP65 in ruhenden B-Zellen in einem BZR-unabhängigen präformierten Komplex vorliegt, der im Wesentlichen aus SLP65, CIN85 und CD2AP besteht. Diese präformierten Proteininteraktionen sind notwendig zur Rekrutierung von SLP65 in die aktivierten BZR- Mikrosignalosomen und sie sind daher essentiell für die B-Zell-Aktivierung nach Antigenerkennung. Des Weiteren konnte ich zeigen, dass SLP65 einer komplexen Phosphorylierung unterliegt und diese u.a. daran beteiligt ist, SLP65 an MAP-Kinase Signalwege zu koppeln. Mittels der Kombination aus proteomischen und funktionellen Studien ist es gelungen, die Funktionsweise und Regulation von SLP65 in B-Zellen zu charakterisieren.